原代培养大鼠前列腺细胞建立前列腺增生筛药模型 |
| |
作者姓名: | 吴建辉 李军 苏欣 闫晗 桂博 蒋秀蓉 孙祖越 |
| |
作者单位: | [1]上海市计划生育科学研究所,中国生育调节药物毒理检测中心,上海200032 [2]浦东新区人民医院泌尿科,上海201200 |
| |
基金项目: | 国家自然科学青年基金项目(21007041);十二五“重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09301-005);上海市科委研发公共服务平台项目(13DZ2291300);上海市人才发展基金资助项目(201372). |
| |
摘 要: | 目的建立原代培养大鼠前列腺上皮细胞体外筛药模型。方法无菌状态下取雄性SD大鼠腹侧叶前列腺,称量后,剪成1 mm3小块,经Ⅱ型胶原酶消化1 h后,过滤、离心获取前列腺细胞,接种于24孔板培养并对细胞进行形态学和免疫组织化学鉴定。获取的大鼠前列腺上皮细胞分别接种于96孔板和24孔板培养12 d后给予系列剂量(0.1~1000μmol/L)的他莫昔芬和阳性药物爱普列特处理72 h,利用CCK-8法检测前列腺上皮细胞存活率并计算药物IC50值,并进一步通过Giemsa染色后观察细胞生长及形态变化。结果细胞鉴定结果显示,获取的细胞具典型上皮细胞形态特征,细胞角蛋白和前列腺特异性抗原表达阳性,提示所获细胞为前列腺上皮细胞。爱普列特与前列腺上皮细胞孵育72 h后,CCK-8法检测结果显示能够明显抑制前列腺上皮细胞生长,其IC50值为42.7μM,进一步镜下观察结果显示,爱普列特未明显改变大鼠前列腺上皮细胞形态,但能导致存活细胞数减少。他莫昔芬则对大鼠前列腺上皮细胞生长无明显抑制作用,镜下观察前列腺上皮细胞数量和形态未见明显改变。结论利用原代培养SD大鼠前列腺上皮细胞可以成功建立前列腺增生体外筛选模型。
|
关 键 词: | 前列腺增生 模型 上皮细胞 原代培养 药物筛选,大鼠 |
本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录! |
|