| 甜菜夜蛾核多角体病毒(SeMNPV)ORF100和ORF101基因的克隆、表达与纯化 |
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| 引用本文： | 李玲玲,李朝飞,庞义. 甜菜夜蛾核多角体病毒(SeMNPV)ORF100和ORF101基因的克隆、表达与纯化[J]. 生物技术, 2007, 17(5): 21-24 |
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| 作者姓名： | 李玲玲 李朝飞 庞义 |
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| 作者单位： | 1. 华南师范大学激光生命科学教育部重点实验室,广东,广州,510631
2. 中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室,广东,广州,510275 |
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| 摘 要： | 目的构建甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodoptera exigua nucleopolyhedrovirus,SeMNPV)ORF100(Se100)和ORF101(Se101)基因的原核表达载体,表达并纯化两种蛋白.方法用PCR方法扩增Se100和Se101基因,分别将它们克隆至原核表达载体pQE-30上,转化宿主菌M15[pREP-4],用IPTC进行诱导表达,表达产物用Ni-NTA金属螯合层析法进行纯化,SDS-PAGE检测表达的目的蛋白.结果构建了分别含有Se100和Se101基因的原核表达质粒pQE100和pQE101;SDS-PAGE检测显示,表达的两个融合蛋白的分子量分别为15kDa和31kDa,比预期分子量稍大;Ni-NTA亲和层析结果显示6×His-Se100和6×His-Se101融合蛋白主要存在于pH值为4.5的缓冲液中.结论成功克隆并高效表达了Se100和Se101两个基因,有效纯化了两种蛋白,为深入进行基因的功能研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 甜菜夜蛾核多角体病毒 原核表达 纯化 |
| 文章编号： | 1004-311X（2007）05-0021-04 |
| 收稿时间： | 2007-07-13 |
| 修稿时间： | 2007-08-21 |
Cloning, Expression and Purification of Spodoptera exigua Nucleopolyhedrovirus ORF100 and ORF101 Genes |
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| LI Ling-ling,LI Zhao-fei,PANG Yi. Cloning, Expression and Purification of Spodoptera exigua Nucleopolyhedrovirus ORF100 and ORF101 Genes[J]. Biotechnology, 2007, 17(5): 21-24 |
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| Authors: | LI Ling-ling LI Zhao-fei PANG Yi |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ORF100 ORF101 |
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