人肠道病毒D68型微复制子的建立 |
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引用本文: | 潘明磊,高帅,成金燕,徐亚楠,李显煌,段宇琴,王涛.人肠道病毒D68型微复制子的建立[J].病毒学报,2018(2). |
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作者姓名: | 潘明磊 高帅 成金燕 徐亚楠 李显煌 段宇琴 王涛 |
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作者单位: | 天津大学生命科学学院; |
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摘 要: | 建立人肠道病毒D68型(EV-D68)微复制子体系。利用增强绿色荧光蛋白(EGFP)或萤火虫荧光素酶(FLuc)报告基因替换病毒编码区,通过酶切连接,构建EV-D68 T7和PolⅠ系统微复制子体系,获得重组质粒pT7-miniEGFP、pT7-miniFLuc、pHH21-miniEGFP、pHH21-miniFLuc和pHH21-miniFLuc_(ΔpolyC)。微复制子转染RD细胞,48h后荧光显微镜观察EGFP表达情况或用双报告系统检测荧光素酶表达水平。T7和PolⅠ系统微复制子均可表达报告基因,但PolⅠ系统荧光素酶表达水平是T7系统的5倍。并且病毒非编码区的PolyC区域对于病毒蛋白的表达起着重要的作用。本研究成功构建了EV-D68微复制子体系,为EV-D68非编码区功能研究提供工具。
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