| Ⅰ型马立克病毒UL24蛋白的原核表达及其亚细胞定位的研究 |
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| 作者姓名： | 张言坤 吴佳燕 韩妮 周忠文 苏帅 崔治中 |
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| 作者单位： | 山东农业大学动物医学院,泰安271018;山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271018;山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心,泰安271018;山东农业大学动物医学院,泰安271018;山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271018;山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心,泰安271018;山东农业大学动物医学院,泰安271018;山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271018;山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心,泰安271018;山东农业大学动物医学院,泰安271018;山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271018;山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心,泰安271018;山东农业大学动物医学院,泰安271018;山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271018;山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心,泰安271018;山东农业大学动物医学院,泰安271018;山东省动物生物工程与疾病防治重点实验室,泰安271018;山东省畜禽疫病防制工程技术研究中心,泰安271018 |
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| 摘 要： | 为研究Ⅰ型马立克病毒(MDV)UL24蛋白的亚细胞定位,以MDV GX0101为模板,PCR扩增UL24基因全长,分别克隆到原核表达载体pGEX-6P-1、pET-32a(+)和真核表达载体pEGFP-C1中。将原核表达重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中表达,并进行纯化和鉴定。用纯化蛋白免疫Balb/c小鼠,制备并鉴定抗UL24蛋白的多克隆抗体。通过间接免疫荧光试验(IFA)检测感染GX0101的鸡胚成纤维细胞(CEF)中的UL24蛋白。同时,将真核表达重组质粒pEGFP-C1-UL24转染CEF细胞,通过激光共聚焦显微镜观察UL24蛋白在CEF中的亚细胞定位。结果显示Ⅰ型MDV的UL24基因在原核表达载体中能够正确表达,免疫小鼠后获得抗UL24蛋白的多克隆抗体。该抗体可特异性识别MDV UL24蛋白,且MDV UL24蛋白在CEF的细胞质和细胞核中定位,以上研究结果为进一步研究MDV UL24基因的功能奠定基础。
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| 关 键 词： | Ⅰ型马立克病毒(MDV) UL24基因 多克隆抗体 鉴定 亚细胞定位 |
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