| 猪胸膜肺炎放线杆菌毒素ⅢA基因的克隆、序列分析及原核表达 |
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| 作者姓名： | 陈汉阳 刘军发 何启盖 肖少波 陈焕春 |
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| 作者单位： | 华中农业大学畜牧兽医学院动物病毒室,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (30 2 0 0 0 11)，湖北省“十五”重点科技攻关项目 (2 0 0 1AA2 0 1B0 2 )~~ |
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| 摘 要： | 因胸膜肺炎放线杆菌的致病性主要是由毒素决定的,故参照猪胸膜肺炎放线杆血清2型菌株的序列（GenBank L12145）设计了一对特异性引物，用PCR的方法扩增apxⅢA基因并得到了长3 466bp的片段，然后将其克隆到pMD18T中，经酶切鉴定和序列分析表明克隆是成功的；再将apxⅢA插入到原核表达载体pET28b后，转化BL21(DE3)，在IPTG诱导下获得高效表达，经Western blotting检测证实表达产物有活性。以表达产物包被ELISA板，建立了特异、敏感的ELISA诊断方法。
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| 关 键 词： | 胸膜肺炎放线杆菌，毒素ⅢA（apxⅢA），克隆，原核表达 |
| 文章编号： | 1006-6179(2003)03-0324-06 |
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