Qβ RNA 复制酶中亚基的共表达对β亚基溶解性的影响

在体外RNA和蛋白质合成及自复制系统的研究中，Qβ RNA复制酶作为以RNA为模板的RNA聚合酶，是比较重要的应用酶种之一。该酶由4个亚基组成，其中只有 β亚基是由病毒基因编码，而其他3个亚基都是宿主蛋白。利用普通表达载体合成Qβ复制酶时，得到的β亚基几乎都是不溶性蛋白，从而影响了Qβ复制酶的活性和产率。为尝试提高β亚基的溶解性，构建含有β亚基基因的表达质粒pBAD 33rep，同时利用pET21a(+)为表达载体表达其他3个亚基进行共表达研究。不同亚基组合的共表达结果通过SDSPAGE分析表明，当β亚基与EFTuTs亚基共表达时，溶解度有一定的提高，而且可溶性部分也具有复制酶活性。通过调节共表达诱导物浓度，相对增强可溶性β亚基的表达，可溶性Qβ复制酶酶量得到相应的提高。