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盐角草磷酸乙醇胺N-甲基转移酶基因(SePEAMT)启动子的克隆及瞬时表达
引用本文:马赛箭,苏乔,吴凇,安利佳.盐角草磷酸乙醇胺N-甲基转移酶基因(SePEAMT)启动子的克隆及瞬时表达[J].中国生物工程杂志,2008,28(8):69-73.
作者姓名:马赛箭  苏乔  吴凇  安利佳
作者单位:大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系 大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系 大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系 大连理工大学环境与生命学院生物科学与工程系
摘    要:磷酸胆碱是合成磷脂酰胆碱和甘氨酸甜菜碱的重要前体,磷酸乙醇胺N-甲基转移酶(PEAMT)是磷酸胆碱合成的关键酶。根据已知的SePEAMT cDNA5'端序列设计两个基因特异的反向引物(PP1,PP2),通过锚定PCR获得了PEAMT起始密码子上游1249bp的序列。RLM-RACE反应确定其转录起始位点A位于起始密码子上游301bp处,由此获得了948bp的SePEAMT启动子序列。PlantCARE和PLACE在线启动子预测工具分析表明:该序列除了含有启动子的基本元件TATA-box和CAAT-box外,还含有一些胁迫诱导元件(如ABRE、HSE、LTR)和花粉特异的激活元件AGAAA。构建了SePEAMT启动子与报告基因GUS 融合的表达载体pPro,并通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,染色结果表明SePEAMT启动子可以有效地驱动GUS基因的瞬时表达。

关 键 词:锚定PCR  启动子  序列分析  瞬时表达  磷酸乙醇胺N-甲基转移酶  
收稿时间:2008-03-12
修稿时间:2008-04-03

Isolation and Transient Expression Assay of PEAMT Gene Promoter from Salicornia europaea
MA Sai-jian,SU Qiao,WU Song,AN Li-jia.Isolation and Transient Expression Assay of PEAMT Gene Promoter from Salicornia europaea[J].China Biotechnology,2008,28(8):69-73.
Authors:MA Sai-jian  SU Qiao  WU Song  AN Li-jia
Abstract:
Keywords:phosphoethanolamine N-methyltransferase  anchored PCR  promoter  sequence analysis  transient expression
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