| siRNA沉默G6PD表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 朱月春,吕会茹,李丹怡,童淑芬. siRNA沉默G6PD表达对人皮肤黑色素瘤细胞生长及凋亡的影响[J]. 生物化学与生物物理进展, 2008, 35(3): 327-334 |
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| 作者姓名： | 朱月春 吕会茹 李丹怡 童淑芬 |
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| 作者单位： | 昆明医学院生物化学教研室,昆明,650031 |
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| 摘 要： | 研究表明,葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)与肿瘤的发生、发展、临床表型及治疗和预后有关.为阐明G6PD与肿瘤的关系及其机理,针对人G6PD基因设计3条siRNA和一条无关序列,再据每一序列,合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载体pRNAT-u6.2/Lenti连接,转染人皮肤黑色素瘤A375细胞,Real-time PCR筛选有效的一条siRNA,经病毒颗粒包装和病毒生产并感染A375细胞,G418筛选后,挑取单个阳性克隆放大培养,Western blotting检测siRNA干扰G6PD效率为88.83%,构建成G6PD缺陷型A375稳转细胞(A375-G6PDA).与野生型A375细胞(A375-WT)比较,A375-G6PD△的G6PD活性仅为21.53%,细胞倍增时间延长,增殖被抑制,克隆形成率降低25%(P0.05),提示,G6PD缺陷可能通过下调P53蛋白表达和上调Caspase.3的表达,抑制G2/M期向G0/G1期转换的进程,促进A375的凋亡,机理有待于进一步探讨.
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| 关 键 词： | siRNA干扰 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 人皮肤黑色素瘤 稳转细胞株 细胞周期 P53 Caspase-3 siRNA 蛋白表达 皮肤黑色素瘤 细胞生长 凋亡相关蛋白 影响 Melanoma Human Skin Apoptosis The Growth Expression Silencing 转换 Caspase 缺陷型 细胞数 克隆形成率 增殖 延长 细胞倍增时间 |
| 收稿时间： | 2007-07-20 |
| 修稿时间： | 2008-01-08 |
Effects of Silencing G6PD Expression on The Growth and Apoptosis in Human Skin Melanoma |
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| ZHU Yue-Chun,LU Hui-Ru,LI Dan-Yi and TONG Shu-Fen. Effects of Silencing G6PD Expression on The Growth and Apoptosis in Human Skin Melanoma[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2008, 35(3): 327-334 |
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| Authors: | ZHU Yue-Chun LU Hui-Ru LI Dan-Yi TONG Shu-Fen |
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| Affiliation: | Department of Biochemistry, Kunming Medical College, Kunming 650031, China;Department of Biochemistry, Kunming Medical College, Kunming 650031, China;Department of Biochemistry, Kunming Medical College, Kunming 650031, China;Department of Biochemistry, Kunming Medical College, Kunming 650031, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | siRNA interference glucose-6-phosphate dehydrogenase human skin melanoma stable cell strain cell cycle P53 Caspase-3 |
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