| 苦荞黄酮-3-羟化酶截短体的原核表达与多克隆抗体制备 |
| |
| 引用本文： | 李玉萍,邓丹丹,张海纳,李学俊,陈 鹏. 苦荞黄酮-3-羟化酶截短体的原核表达与多克隆抗体制备[J]. 西北植物学报, 2013, 33(4): 672-677 |
| |
| 作者姓名： | 李玉萍 邓丹丹 张海纳 李学俊 陈 鹏 |
| |
| 作者单位： | （西北农林科技大学 生命科学学院,陕西杨陵 712100） |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30400282,31171606);西北农林科技大学基本科研业务费专项(QN2009064) |
| |
| 摘 要： | 为了制备苦荞黄酮-3-羟化酶的多克隆抗体,该研究以苦荞种子灌浆期cDNA文库中获得的苦荞黄酮-3-羟化酶基因截短体(truncated Flavanone-3-hydroxylase,TrF3 H)序列为基础,采用PCR扩增F3 H的截短序列编码区(TrF3 H),构建了原核表达载体pET47b-TrF3 H,并转化入大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS中进行诱导表达,将经钴离子螯合层析柱纯化后的目的蛋白切胶回收后制备了高效价的多克隆抗体。结果表明:pET47b-TrF3 H在大肠杆菌Rosetta(DE3)plysS中以包涵体的形式高效表达。蛋白质印迹显示,制备的多克隆抗体能特异识别其对应的抗原,天然的黄酮-3-羟化酶蛋白在苦荞的未成熟种子中大量表达。原核表达体系的建立和多克隆抗体的制备为进一步探讨F3H在苦荞中功能奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 苦荞 黄酮-3-羟化酶 原核表达 多克隆抗体 |
Prokaryotic Expression of Truncated Tartary Buckwheat Flavanone-3-hydroxylase and Preparation of Its Polyclonal Antibody |
| |
| LI Yuping,DENG Dandan,ZHANG Hain,LI Xuejun,CHEN Peng. Prokaryotic Expression of Truncated Tartary Buckwheat Flavanone-3-hydroxylase and Preparation of Its Polyclonal Antibody[J]. Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2013, 33(4): 672-677 |
| |
| Authors: | LI Yuping DENG Dandan ZHANG Hain LI Xuejun CHEN Peng |
| |
| Affiliation: | (College of Life Sciences,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | tartary buckwheat flavanone-3-hydroxylase prokaryotic expression polyclonal antibody |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《西北植物学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《西北植物学报》下载全文 |
|
