| 转谷氨酰胺酶基因在大肠杆菌中的克隆表达 |
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| 引用本文： | 王莉,常忠义,李平作. 转谷氨酰胺酶基因在大肠杆菌中的克隆表达[J]. 中国生物工程杂志, 2004, 24(11): 55-59 |
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| 作者姓名： | 王莉 常忠义 李平作 |
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| 作者单位： | 1. 华东师范大学生命科学学院, 上海 200062;2. 上海伍佰豪生物工程研究发展有限公司, 上海 200233 |
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| 摘 要： | 从轮枝链霉菌Streptoverticilliummobaraense细胞中获得其基因组DNA ,用一对特异性的引物通过PCR的方法扩增出转谷氨酰胺酶 (transglutaminase,TGase)全长基因 ,回收片段并将其连接到表达载体pET30a中 ,转化大肠杆菌DH5α。双向测序表明获得的转谷氨酰胺酶全长基因序列正确。纯化重组质粒转化大肠杆菌BL2 1 (DE3) ,以 1mmol/LIPTG诱导 5h收集菌体进行SDS-PAGE电泳分析 ,与阴性对照相比 ,明显多出了一条蛋白条带 ,紫外扫描显示此带约占总蛋白量的1 7% ,Westernblotting证实此带能够特异性地与兔抗MTG(味之素公司 )的抗体发生反应。测得纯化后得到的TGase蛋白的酶活可以达到 15.1U/mg蛋白。
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| 关 键 词： | 转谷氨酰胺酶 克隆表达 生物活性 |
| 收稿时间： | 2004-03-23 |
| 修稿时间： | 2004-03-23 |
Cloning and Expression of Transglutaminase Gene in Escherichia coli |
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| WANG Li CHANG Zhong-yi LI Ping-zuo. Cloning and Expression of Transglutaminase Gene in Escherichia coli[J]. China Biotechnology, 2004, 24(11): 55-59 |
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| Authors: | WANG Li CHANG Zhong-yi LI Ping-zuo |
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| Affiliation: | WANG Li1 CHANG Zhong-yi1 LI Ping-zuo 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Transglutaminase Gene clone Protein expression and purification Biological activity |
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