慢性间断性低氧诱导大鼠前包钦格复合体磷酸化PKC底物表达增加

延髓腹外侧前包钦格复合体(pre-B?tzinger complex, pre-B?tC)被认为是呼吸节律产生中枢。间断性低氧可诱导呼吸长时程易化(long-term facilitation, LTF),是呼吸可塑性的电生理特征。本研究组前期研究显示慢性间断性低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)诱导大鼠pre-B?tC磷酸化蛋白激酶Cθ(phospho-protein kinase Cθ, P-PKCθ)表达上调。本研究旨在探讨磷酸化-蛋白激酶C底物(P-PKC substrates, P-PKCsub)在大鼠pre-B?tC的超微结构分布以及CIH干预后的表达变化。应用神经激肽1受体(neurokinin-1 receptor, NK1R)免疫反应(immunoreactive, ir)产物作为pre-B?tC神经元的标志,并用抗P-PKCsub抗体双标记进行免疫荧光和免疫电镜观察,用Western blot分析延髓腹外侧区(包含pre-B?tC) P-PKCsub蛋白的表达变化。结果显示,光镜下,NK1R-ir标记主要沿pre-B?tC神经元胞膜分布,清晰勾勒胞体和突起。P-PKCsub-ir标记多呈点状分布在胞体和突起,膜下亦有分布。大部分P-PKCsub-ir神经元共表达NK1R。CIH干预诱导延髓腹外侧区P-PKCsub蛋白表达水平上调。电镜下,NK1R-ir产物主要分布在pre-B?tC神经元胞体和树突的胞膜内表面。P-PKCsub-ir金颗粒分布在pre-B?tC神经元胞体和树突,在细胞膜下有较多分布,内质网和突触后致密体亦可见。以上结果提示,CIH干预可能通过激活PKCθ,上调P-PKCsub蛋白表达,参与pre-B?tC的呼吸可塑性调控。