茶树谷丙转氨酶基因的克隆及其表达分析

该研究基于茶树的转录组数据，采用RT PCR方法从茶树‘黄金芽’cDNA中克隆获得茶树谷丙转氨酶基因（CsAlaAT），利用荧光定量PCR方法，对CsAlaAT在茶树材料‘迎霜’和‘黄金芽’不同组织、温度胁迫与激素处理的表达进行分析。结果显示：CsAlaAT基因开放阅读框长度为1 662 bp，编码553个氨基酸，含有天冬氨酸转氨酶家族（Aspartate aminotransferase family）典型的AAT like保守结构域。多序列比对显示，该序列与多个相关物种的序列一致性达78.83%，与磷酸吡哆醛（PLP）结合的10个氨基酸残基以及第358位赖氨酸催化位点在物种间高度保守。茶树CsAlaAT蛋白属亲水性蛋白，相对分子质量为60 877.5 D，等电点为6.11，碱性、酸性、脂肪族和芳香族氨基酸比例分别为12%、11%、22%和8%，无序化特征不明显，与大麦HvAlaAT具有相似的三维结构。实时定量PCR分析表明，CsAlaAT在茶树‘迎霜’和‘黄金芽’中的表达均具有组织特异性，且均在根部的表达量最高；CsAlaAT响应高温（38 ℃）和低温（4 ℃）胁迫的表达上调；外源施用脱落酸（ABA）和赤霉素（GA）能够抑制茶树中CsAlaAT基因的表达。

Cloning and Expression Analysis of the Gene Encoding Alanine Aminotransferase in Camellia sinensis