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巴西固氮螺菌中P_Ⅱ和P_Z在固氮调节中的不同作用
引用本文:陈三凤,管乐,应娇妍,李周华,王娟,李季伦.巴西固氮螺菌中P_Ⅱ和P_Z在固氮调节中的不同作用[J].微生物学报,2001,41(5).
作者姓名:陈三凤  管乐  应娇妍  李周华  王娟  李季伦
作者单位:中国农业大学生物学院;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室北京;中国农业大学农业生物技术国家重点实验室
摘    要:在巴西固氮螺菌 (Azospirillumbrasilense)中 ,glnB和glnZ是两个高度同源基因 ,分别位于 3 7kb EcoRI+PstI和 3 7kb SalI的两个不同的染色体片段上。用卡那霉素盒 (Kmr cas sette)插入法 ,对glnB和glnZ分别进行定位诱变 ,并获得相应的突变株 ,即glnB- 和glnZ- 。研究表明 ,glnB- 突变株丧失固氮酶活性 ,表现为Nif- ,而glnZ- 象野生型菌株一样具有固氮酶活性。为了进一步研究这两个基因的功能 ,将glnB和glnZ分别构建在pVK1 0 0载体上形成重组质粒pVK -Ⅱ和pVK -Z ,对glnB- 和glnZ- 突变株进行互补实验 ,进一步证明了glnB与固氮酶活有直接相关性 ,而glnZ无此作用。同时 ,通过三亲接合法将pVK -Ⅱ和pVK -Z分别转移到巴西固氮螺菌野生型Yu62和具有一定抗铵能力的draT- 突变株中 ,使glnB和glnZ的拷贝数增加 ,进一步比较它们的固氮酶活性。结果表明多拷贝的glnB基因 ,能显著提高固氮酶活性 ,而多拷贝的glnZ对固氮酶活性无影响。同时 ,将pVK Ⅱ和pVK -…

关 键 词:巴西固氮螺菌    glnB基因    glnZ基因    突变株    固氮酶活性

THE DIFFERENT FUNCTIONS OF glnB AND glnZ FROM AZOSPIRILLUM BRASILENSE YU62 IN THE CONTROL OF NITROGEN FIXATION
Abstract:
Keywords:Azospirillum brasilense Yu62  glnB  gene  glnZ gene  Mutant  Nitrogenase
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