| 操纵茶树类黄酮3′-羟基化酶生物合成B环-3′,4′-二羟基黄酮类化合物 |
| |
| 引用本文： | 周天山,余有本,肖斌,鮑露,高岳芳. 操纵茶树类黄酮3′-羟基化酶生物合成B环-3′,4′-二羟基黄酮类化合物[J]. 微生物学报, 2017, 57(3): 447-458 |
| |
| 作者姓名： | 周天山 余有本 肖斌 鮑露 高岳芳 |
| |
| 作者单位： | 西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100,西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100,西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100,西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100,西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌712100 |
| |
| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系(CARS-23) |
| |
| 摘 要： | 【目的】操纵茶树类黄酮3′-羟基化酶,生物合成B环-3′,4′-二羟基黄酮类化合物圣草酚、二氢槲皮素和槲皮素。【方法】构建了4个茶树类黄酮3′-羟基化酶基因(CsF3′H)和拟南芥的P450还原酶基因(ATR)融合表达质粒:SUMO-CsF3'H[7-517]::ATR1[49-688]3 AA、SUMO-CsF3'H[28-517]::ATR1[49-688]3 AA、SUMO-CsF3'H[7-517]::ATR2[75-711]3 AA和SUMO-CsF3'H[28-517]::ATR2[75-711]3 AA,分别转化大肠杆菌菌株TOP10、DH5α和BL21,获得12个转化菌株S1–S12;构建了茶树类黄酮3′-羟基化酶基因CsF3′H表达质粒p YES-Dest52-CsF3′H,转化酵母菌株WAT11,得到转化菌株S13;构建了茶树类黄酮3′-羟基化酶基因CsF3′H表达质粒pES-URA-CsF3′H,及茶树黄烷酮3-羟基化酶基因CsF3H与拟南芥黄酮醇合成酶基因At FLS的融合表达质粒pES-HIS-CsF3H::At FLS 9AA,二者共转化酵母菌株WAT11,获得转化菌株S14。【结果】转化SUMO-CsF3'H[28-517]::ATR1[49-688]3 AA质粒的TOP10菌株S6在25°C条件下发酵,转化效率最高,能将1000μmol/L柚皮素、二氢山奈酚和山奈酚,分别转化生成287.93μmol/L圣草酚、131.76μmol/L二氢槲皮素和188.62μmol/L槲皮素。发酵菌株S13能分别将1000μmol/L柚皮素、二氢山奈酚和山奈酚,最多能转化生成734.32μmol/L圣草酚、446.07μmol/L二氢槲皮素和594.64μmol/L槲皮素。喂食S14发酵菌株5 mmol/L的底物柚皮素,在发酵36–48 h中,最多能生成1412.16μmol/L圣草酚、490.25μmol/L山奈酚、445.75μmol/L槲皮素、66.75μmol/L二氢槲皮素和73.50μmol/L二氢山奈酚。【结论】本研究首次将茶树类黄酮3′-羟基化酶基因应用于B环-3′,4′-二羟基黄酮类化合物圣草酚、二氢槲皮素和槲皮素的生物合成。
|
| 关 键 词： | 关键词：茶树类黄酮3′-羟基化酶，B环-3′ 4′-二羟基黄酮类化合物，生物合成 |
| 收稿时间： | 2016-08-19 |
| 修稿时间： | 2016-12-01 |
Engineering of a flavonoid 3'-hydroxylase from tea plant (Camellia sinensis) for biosynthesis of B-3',4'-dihydroxylated flavones |
| |
| Tianshan Zhou,Youben Yu,Bin Xiao,Lu Bao and Yuefang Gao. Engineering of a flavonoid 3'-hydroxylase from tea plant (Camellia sinensis) for biosynthesis of B-3',4'-dihydroxylated flavones[J]. Acta microbiologica Sinica, 2017, 57(3): 447-458 |
| |
| Authors: | Tianshan Zhou Youben Yu Bin Xiao Lu Bao Yuefang Gao |
| |
| Affiliation: | College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China and College of Horticulture, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | flavonoid 3''-hydroxylase from Camellia sinensis B-3'',4''-dihydroxylated flavones biosynthesis |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《微生物学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《微生物学报》下载全文 |
|
