多聚甲醛固定对流式细胞术检测HepG2细胞整合素αVβ3的影响 |
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引用本文: | 孙栋栋,杨利军,杨涛.多聚甲醛固定对流式细胞术检测HepG2细胞整合素αVβ3的影响[J].生物技术通讯,2011,22(3):411-414. |
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作者姓名: | 孙栋栋 杨利军 杨涛 |
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作者单位: | 山西医科大学,生物化学与分子生物学教研室,省部共建细胞生理学教育部重点实验室,山西,太原,030001 |
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基金项目: | 山西省青年科学基金,山西省高等学校优秀青年学术带头人支持计划 |
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摘 要: | 目的:检测HepG2细胞表面整合素αVβ3的表达情况,同时探讨多聚甲醛的固定处理对HepG2细胞表面αVβ3检测的影响。方法:分别用0.25%的胰蛋白酶和1%的EDTA消化收集HepG2细胞,以FITC标记的抗αVβ3单抗检测细胞表面αVβ3的表达情况;在检测中,用2%浓度的多聚甲醛固定细胞后,采用流式细胞仪测定多聚甲醛固定组和未固定组HepG2细胞的平均荧光强度和阳性细胞率,对结果进行统计学分析。结果:以胰蛋白酶消化HepG2细胞后,抗αVβ3单抗标记的阳性细胞率为3.6%,远低于EDTA消化组的阳性细胞率(47%)。多聚甲醛固定组的平均荧光强度为2.23,阳性细胞率为4.6%;而未固定组的平均荧光强度为6.97,阳性细胞率为30.1%。以上结果经统计学分析,均具有显著性差异(P<0.05)。结论:HepG2细胞表达整合素αVβ3,多聚甲醛固定处理可干扰对HepG2细胞αVβ3的检测。
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关 键 词: | HepG2细胞 整合素 αVβ3 多聚甲醛 流式细胞术 |
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