β-脱卤酶的基因克隆表达及其酶学性质 |
| |
作者姓名: | 常晓婷 林春娇 吴坚平 杨立荣 |
| |
作者单位: | 浙江大学,化学工程与生物工程学系,浙江,杭州,310027 |
| |
摘 要: | 根据GenBank中的序列设计引物,克隆芽孢杆菌中的β-脱卤酶基因(命名为bhd)。以pET30a(+)为载体、Escherichia coli BL21(DE3)-CondonPlus为宿主菌,实现了bhd的高效表达。使用HisTrapTMFF亲和层析柱纯化重组β-脱卤酶,分子量约为23.1 kD。酶学性质研究表明,纯化的重组β-脱卤酶水解3-氯丙酸制备3-羟基丙酸的最适反应体系为30°C,100 mmol/L,pH 7.0的磷酸钠缓冲液。在最适反应条件下,重组β-脱卤酶的比活为16.2 U/mg,Km和Vmax分别为3.26μmol/L和17.86 mmol/(min.g protein)。在最适反应条件下,以10 mmol/L 3-氯丙酸为底物,反应36 h的转化率在93%以上。
|
关 键 词: | 芽孢杆菌 β-脱卤酶 3-羟基丙酸 |
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录! |
| 点击此处可从《微生物学通报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《微生物学通报》下载全文 |
|