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| pH对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素的降解影响 | |
| 作者姓名： | 张盛 郝玉有 储炬 王永红 郭美锦 张嗣良 庄英萍 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金 , 上海市曙光跟踪计划 |
| 摘 要： | 使用Pichiapastoris表达重组人复合α干扰素(cIFN)会发生降解、聚合等不均一表达的现象.在5 L发酵罐中考察了不同诱导pH对cIFN表达产生降解的影响,结果发现在适合酵母生长的pH 3.0～7.0范围内,当诱导pH为4.0～5.0时,cIFN不均一表达现象最少,生物活性达到2.5×108 IU/mL.通过测定发酵液中总蛋白酶活和细胞活性寻找了cIFN降解出现的原因:发现低诱导pH下细胞死亡率升高释放更多酶系,高诱导pH下蛋白酶活性明显增大,两者都使蛋白酶作用加强,加剧cIFN的降解;特别是诱导pH为7.0时,适宜的pH使蛋白酶酶活陡升,将cIFN完全降解. |
| 关 键 词： | pH cIFN 降解 流式细胞仪 毕赤酵母表达 重组人 复合α干扰素 完全降解 影响 Degradation Effect 加强 作用 蛋白酶 酶活性 高诱导 多酶系 细胞死亡率 细胞活性 总蛋白 发酵液 测定 生物活性 范围 |
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