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大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体的构建
引用本文:贾玉红,;马天舒,;姜妙娜,;孙杰,;李淑艳,;贾弘禔. 大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体的构建[J]. 国外医学:分子生物学分册, 2009, 0(5): 387-390
作者姓名:贾玉红,  马天舒,  姜妙娜,  孙杰,  李淑艳,  贾弘禔
作者单位:[1]大连医科大学病理生理学教研室,辽宁省大连市116044; [2]大连市中医研究所,辽宁省大连市116013; [3]北京大学医学部生物化学与分子生物学系,北京市100191
摘    要:目的构建大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测其在神经元中的表达。方法采用PCR方法获得GluR2基因启动子区目的片段(-298~+283),双酶切后插入到pGL3-Basic载体中构成重组表达载体,使萤火虫荧光素酶报告基因的表达受GluR2启动子控制。将构建的重组表达载体或pGL3-Basic载体分别与内参质粒pRL—CMV(表达海肾荧光素酶)共转染原代培养皮质神经元,24h后用双荧光检测试剂盒测定萤火虫荧光素酶及海肾荧光素酶活性。结果重组表达载体经双酶切及测序鉴定证明构建正确,该重组表达载体在神经元中特异性高表达萤火虫荧光素酶。结论成功构建大鼠GluR2基因启动子控制的萤火虫荧光素酶表达载体,并检测到该载体在神经元中的特异性表达。

关 键 词:GluR2  神经元  pGL3-Basic  基因表达构建  萤火虫荧光素酶

Construction of Firefly Luciferase Expression Vector Driven by Rat GIuR2 gene Promoter
Affiliation:JIA Yuhong , MA Tianshu, JIANG Miaona, SUN Jie , LI Shuyan , JIA Hongti( 1Department of Pathophysiology, Dalian Medical University, Dalian, Liaoning, 116044, China;2Dalain Institute of Traditional Chinese Medicine, Dalian, Liaoning, 116013, China; 3Department of Biochemistry and Molecular Biology, Peking University Health Science Center, Beijing, 100191, China)
Abstract:
Keywords:GluR2  neuron  pGL3-Basic  recombinant expression vector  firefly luciferase
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