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肝脏去唾液酸糖蛋白受体特异性RNA适配子的SELEX筛选与鉴定
引用本文:刘嘉,;杨燕,;胡斌,;马智勇,;余源,;黄红平,;陆蒙吉,;冯新华,;郭培宣,;杨东亮. 肝脏去唾液酸糖蛋白受体特异性RNA适配子的SELEX筛选与鉴定[J]. 国外医学:分子生物学分册, 2009, 0(3): 197-202
作者姓名:刘嘉,  杨燕,  胡斌,  马智勇,  余源,  黄红平,  陆蒙吉,  冯新华,  郭培宣,  杨东亮
作者单位:[1]华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,湖北武汉市430030; [2]华中科技大学同济医学院附属同济医院实验医学研究中心,湖北武汉市430030; [3]华中科技大学同济医学院微生物学教研室,湖北武汉市430030; [4]贝勒医学院分子与细胞牛物学系TX77030,美国; [5]辛辛那提大学医学院生物医学工程系OH45267,美国
基金项目:国家自然科学基金(No.30571646),国家高技术研究发展计划资助项目(863计划)(No.2006AA02Z128)
摘    要:目的获得能够特异性高亲和力结合肝脏特异性去唾液酸糖蛋白受体(asialoglycoprotein receptor,ASGPR)的RNA适配子,为开发诊断和治疗肝脏疾病的靶向性试剂和药物奠定基础。方法合成一个长度为115nt含有25个随机序列的单链DNA随机文库,通过体外转录构建出单链RNA适配子随机文库,以肝脏ASGPR大亚基为靶蛋白,采用SELEX(systematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术筛选具有高亲和力的AsGPR特异性RNA适配子;通过膜结合测定实验、凝胶阻滞实验鉴定筛选适配子对靶蛋白的特异性和亲和力。结果经过12轮筛选获得了具有高亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子。结论成功地筛选出了具有离亲和力的肝脏ASGPR特异性RNA适配子库。

关 键 词:适配子  SELEX技术  去唾液酸糖蛋白受体

Selection and Identification of RNA Aptamer Specific for Hepatic Asialoglycoprotein Receptor by SELEX
Affiliation:LIU Jia,YANG Yan, HU Bin, MA Zhiyong, HUANG Hongping, YU Yuan, LU Mengji, FENG Xinhua , GUO Peixuan, YANG Dongliang(1.Division of Clinical Immunology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, 430030, China;2.Department of Experimental Medicine, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, 430030, China;3.Department of Microbiology, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, 430030, China;4.Department of Molecular and Cellular Biology, Baylor College of Medicine Houston, TX77030, United States;5.Department of Biomedical Engineering, College of Medicine/College of Engineering, University of Cincinnati, Cincinnati, OH45267, United States)
Abstract:
Keywords:aptamer  SELEX  asialoglycoprotein receptor
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