| 黑曲霉嗜热β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的克隆表达及其魔芋降解产物分析 |
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| 引用本文： | 倪玉佳,周旻昱,欧阳嘉,郑兆娟,勇强.黑曲霉嗜热β-甘露聚糖酶在毕赤酵母中的克隆表达及其魔芋降解产物分析[J].生物技术通报,2014(6). |
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| 作者姓名： | 倪玉佳 周旻昱 欧阳嘉 郑兆娟 勇强 |
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| 作者单位： | 南京林业大学化学工程学院;南京林业大学森林资源与环境学院;江苏省生物质绿色燃料与化学品重点实验室; |
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| 基金项目： | 国家林业公益性行业科研专项(201404615);教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-11-0988);江苏省杰出青年基金(BK2012038);江苏省高校优势学科建设工程资助项目(PAPD) |
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| 摘 要： | 根据毕赤酵母密码子偏好性优化设计合成一段来自黑曲霉BK01的嗜热β-甘露聚糖酶基因,通过构建表达载体pPICZαA-man线性化后电转化入不同的毕赤酵母宿主,获得最佳重组菌KM71-MAN,其发酵罐发酵酶活最高达2 318.85 IU/mL。表达产物纯化后的分子量约为40 kD,最适反应温度为80℃,最适pH为5.0。该酶在70℃(pH5.0)保温44 h仍能保留43%的酶活力且在pH3.0-7.0范围内保温70 h(50℃)酶活力仍能保留85%以上。利用发酵罐所产重组酶酶解魔芋胶制备甘露低聚糖,产物以甘露二糖和甘露六糖为主,甘露低聚糖得率为55.6%。该重组β-甘露聚糖酶具有良好的热稳定性和pH稳定性,在魔芋制备甘露低聚糖中具有较好的应用潜能。
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| 关 键 词： | β-甘露聚糖酶 密码子偏好性 毕赤酵母 酶学性质 低聚甘露糖 |
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