人工miRNA沉默基因的研究 |
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引用本文: | 张献贺,孔稳稳,李勇,李晶.人工miRNA沉默基因的研究[J].生物技术通报,2014(4). |
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作者姓名: | 张献贺 孔稳稳 李勇 李晶 |
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作者单位: | 东北农业大学生命利学学院农业生物功能基因重点实验室; |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31070265) |
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摘 要: | 人工miRNA(amiRNA)是一种高效的基因沉默技术,其原理是以植物内源miRNA的前体为基本骨架,将其茎环结构中的miRNA/miRNA*序列替换为amiRNA/amiRNA*序列,使产生的amiRNA作用于目标靶基因,以实现对靶基因表达的抑制。以拟南芥中转录因子基因MYB28为例,介绍了amiRNA的设计基本原理和构建方法。在MYB28基因序列的3'端、5'端和中间部分分别设计了amiRNA,以拟南芥内源的miRNA 319a前体为骨架,以靶向于MYB28的amiRNA序列替代原有的miRNA 319a序列,在拟南芥中过量表达,获得的转基因植株中MYB28表达水平平均降低了86%。根据试验结果对人工miRNA沉默基因技术的特点及应用前景进行了讨论。
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关 键 词: | 人工miRNA RNA干扰 拟南芥 基因沉默 |
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