牦牛Prdm9基因保守区的原核表达及多克隆抗体制备 |
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引用本文: | 曾琴,黄林,林亚秋,金素钰,郑玉才.牦牛Prdm9基因保守区的原核表达及多克隆抗体制备[J].生物技术通报,2014(3). |
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作者姓名: | 曾琴 黄林 林亚秋 金素钰 郑玉才 |
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作者单位: | 西南民族大学生命科学与技术学院; |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31240053);中央高校基本科研业务费资助课题(12NZYTH06);西南民族大学研究生创新型科研项目(CX2013SZ54) |
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摘 要: | 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从牦牛睾丸组织获得Prdm9基因的cDNA的保守区序列,克隆到pMD19-T载体中。经测序确证后,将基因克隆到原核表达载体PET32a(+),转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白的高效表达。利用Ni柱亲和层析纯化蛋白,将得到的抗原免疫日本大白兔,获得了1∶4效价的牦牛PRDM9保守序列的多克隆抗体,可用于后续试验的研究。
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关 键 词: | prdm牦牛 杂交不育 原核表达 多克隆抗体 |
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