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牦牛Prdm9基因保守区的原核表达及多克隆抗体制备
引用本文:曾琴,黄林,林亚秋,金素钰,郑玉才.牦牛Prdm9基因保守区的原核表达及多克隆抗体制备[J].生物技术通报,2014(3).
作者姓名:曾琴  黄林  林亚秋  金素钰  郑玉才
作者单位:西南民族大学生命科学与技术学院;
基金项目:国家自然科学基金项目(31240053);中央高校基本科研业务费资助课题(12NZYTH06);西南民族大学研究生创新型科研项目(CX2013SZ54)
摘    要:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从牦牛睾丸组织获得Prdm9基因的cDNA的保守区序列,克隆到pMD19-T载体中。经测序确证后,将基因克隆到原核表达载体PET32a(+),转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白的高效表达。利用Ni柱亲和层析纯化蛋白,将得到的抗原免疫日本大白兔,获得了1∶4效价的牦牛PRDM9保守序列的多克隆抗体,可用于后续试验的研究。

关 键 词:prdm牦牛  杂交不育  原核表达  多克隆抗体
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