VSV糖蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测 |
| |
引用本文: | 韩岩岩,宋德光.VSV糖蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用的检测[J].生物技术通报,2014(4). |
| |
作者姓名: | 韩岩岩 宋德光 |
| |
作者单位: | 遵义医学院公共卫生学院;吉林大学畜牧兽医学院; |
| |
基金项目: | 贵州省科学技术基金项目(黔科合J字[2013]2313号);遵义医学院博士启动基金项目(F-584) |
| |
摘 要: | 构建水泡性口炎病毒糖蛋白(VSV-G)酵母双杂交诱饵载体,检测其在酵母细胞中的表达和自激活作用,为进一步研究酵母双杂交系统筛选与VSV-G相互作用蛋白奠定基础。通过RT-PCR方法从水泡性口炎病毒(VSV)克隆糖蛋白(G)基因,BamH I和Sal I双酶切后连接诱饵载体pSos,获得诱饵质粒pSos-VSV-G,经测序鉴定后pSos-VSV-G转化到酵母菌株cdcH25(α),在营养缺陷培养基中观察pSos-VSV-G的自激活作用和毒性作用,同时利用蛋白印迹法分析诱饵蛋白的表达。成功扩增VSV-G基因,并准确克隆入pSos中,诱饵载体pSos-VSV-G成功转化到酵母菌株cdcH25(α)中,经表型筛选检测无自激活作用和毒性作用,蛋白印迹法检测证实pSos-VSV-G在酵母细胞中表达诱饵蛋白。可以利用酵母双杂交系统筛选与VSV-G相互作的蛋白质。
|
关 键 词: | 水泡性口炎病毒 糖蛋白 酵母双杂交 诱饵载体 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|