新疆无苞芥Na~+/H~+逆向转运蛋白基因OpNHX1的克隆、表达分析与功能验证 |
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引用本文: | 赵云霞,郭丹丽,魏艳玲,黄先忠.新疆无苞芥Na~+/H~+逆向转运蛋白基因OpNHX1的克隆、表达分析与功能验证[J].生物技术通报,2014(7). |
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作者姓名: | 赵云霞 郭丹丽 魏艳玲 黄先忠 |
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作者单位: | 石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室; |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(31060149);石河子大学高层次人才启动项目(RCZX200902);新世纪优秀人才支持计划(NCET-12-1072) |
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摘 要: | 从耐盐植物无苞芥中克隆获得了1个Na+/H+逆向转运蛋白基因NHX1,命名为OpNHX1(GenBank登录号:KC200248)。OpNHX1基因cDNA全长2 153 bp,包含一个1 605 bp的开放阅读框,编码534个氨基酸。系统进化树分析表明,OpNHX1编码产物与拟南芥、小盐芥亲缘关系较近,属于同一进化分支。实时荧光定量PCR分析表明,该蛋白基因在无苞芥根、茎、叶、花和荚果中均有表达,其中茎中表达量最高。半定量RT-PCR分析表明,该基因受高盐、干旱、低温及ABA的诱导上调表达。进一步将该基因在拟南芥中过量表达,显著提高了转基因植株在盐胁迫下的存活率,说明OpNHX1基因参与了植物的耐盐性。酵母功能互补试验结果显示,该基因转化酵母Δnhx1后可以补充NHX1的缺失,表明OpNHX1参与Na+/H+的转运。
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关 键 词: | Na+/H+逆向转运蛋白 无苞芥 抗逆 酵母功能互补 |
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