人血管内皮细胞生长抑制因子在巴斯德毕酵母中的分泌表达

血管内皮细胞生长抑制因子肿瘤部位新生血管的形成，切断肿瘤细胞营养供应及废物排泄通道，抑制肿瘤细胞恶性增殖。将编码成熟的人血管内皮细胞生长抑制因子基因克隆到表达载体pPICZα中，电转化P.pasto-ris GS115菌株，抗生素Zeocin^TM浓度梯度筛选高抗性转化子，PCR筛选阳性重组菌株。经表型鉴定后，用甲醇进行诱导表达，SDS－PAGE和Western^TM浓度筛选高抗性转化子，PCR筛选阳性重组菌株。经表表型鉴定后，用甲醇进行诱导表达，SDS－PAGE和Western印迹杂交结果证实了表达产物为重组人血管内皮细胞生长抑制因子-his6融合蛋白，表达量约为5mg/L。经细胞毒性试验测定，表达产物对人脐静脉内皮细胞HUVEC增殖具有较明显的抑制作用。