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SARS病毒S和N蛋白抗原表位的基因合成、融合表达及纯化鉴定
引用本文:李越希, 张锦海, 朱敏生, 陶开华, 黄培堂,. SARS病毒S和N蛋白抗原表位的基因合成、融合表达及纯化鉴定[J]. 生物工程学报, 2004, 20(6): 856-861
作者姓名:李越希   张锦海   朱敏生   陶开华   黄培堂  
作者单位:1. 南京军区军事医学研究所,南京,210002
2. 军事医学科学院,北京,100071
摘    要:通过计算机分析SARS病毒N蛋白和S蛋白的氨基酸序列 ,初步确定含强抗原表位的N蛋白片段和S蛋白片段 ,共 5 6 0个氨基酸。选择真核和原核生物均偏爱的密码子 ,化学合成全新的SARS病毒N蛋白片段和S蛋白片段的基因序列 ,利用基因工程技术将两个基因片段串联 ,克隆至质粒Pet2 8a(+)内的NcoⅠ/EcoRⅠ位点 ,表达S蛋白片段和N蛋白片段的融合蛋白。将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3) ,筛选获得了高效表达SARS病毒S蛋白片段和N蛋白片段融合蛋白的工程菌 ,表达的SARS病毒的融合蛋白约占菌体蛋白总量的 30 %左右 ,部分以可溶性形式存在。经离子交换柱和反相高压液相纯化获得了表达的融合蛋白 ,经初步鉴定 ,显示该融合蛋白有较好的抗原性和特异性.

关 键 词:SARS病毒   抗原表位   基因表达   纯化   抗原性  
文章编号:1000-3061(2004)06-0856-06
修稿时间:2004-04-01

Screening, Expression, Purification and Identification of Antigenic Determinants of SARS Virus S and N Proteins
LI Yue-Xi ZHANG Jin-Ha ZHU Min-Sheng TAO Kai-Hua HUANG Pei-Tang. Screening, Expression, Purification and Identification of Antigenic Determinants of SARS Virus S and N Proteins[J]. Chinese journal of biotechnology, 2004, 20(6): 856-861
Authors:LI Yue-Xi ZHANG Jin-Ha ZHU Min-Sheng TAO Kai-Hua HUANG Pei-Tang
Affiliation:LI Yue-Xi 1* ZHANG Jin-Ha 1 ZHU Min-Sheng TAO Kai-Hua 1 HUANG Pei-Tang 2 1
Abstract:
Keywords:SARS virus   antigenic determinants   gene expression   purification   antigenicity
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