产气气杆菌茁霉多糖酶的研究I．酶的提纯和性质

产气气杆菌(Aerobacter aerogenes) 10016的茁霉多糖酶(pullulanase E．C．3．2．1．41)用Sephadex G100凝胶过滤、聚丙烯酰胺垂直板型凝胶电泳进行纯化，得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳均一的纯酶。纯酶作用的最适温度为50℃，最适pH为5．3—5．8，耐热性较差，50℃ 4小时后仅存活力10％。纯酶在pH4．3一8．6稳定。酶作用于糯米淀粉的米氏常数Km为2.0×10-2克／毫升。用聚丙烯酰胺薄屡凝胶等电聚焦测定酶的等电点pI为3．8，用SDS凝胶电泳测定酶的分子量为51，000—52，000；此酶是一种糖蛋白；含糖总量为6．5—7．0％；纯酶能专一性的水解茁霉多糖、糯米淀粉，也能分解糊精，而不作用于糖原、纤维二糖以及环状糊精。