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核定位信号在热休克蛋白 70 抑制氧化应激所致 细胞核仁分离中的作用
引用本文:王慷慨,鄂顺梅,蒋 磊,张华莉,刘 可,张玲莉,肖献忠. 核定位信号在热休克蛋白 70 抑制氧化应激所致 细胞核仁分离中的作用[J]. 生物化学与生物物理进展, 2005, 32(5): 456-462
作者姓名:王慷慨  鄂顺梅  蒋 磊  张华莉  刘 可  张玲莉  肖献忠
作者单位:中南大学湘雅医学院病理生理学教研室,长沙,410078
基金项目:国家重点基础研究发展规划项目(973)(G2000056908)和国家自然科学基金资助项目(30300177,30270533).
摘    要:为探讨核定位信号在热休克蛋白 70 (HSP70) 抑制 H2O2 所致核仁损伤中的作用,采用分子克隆技术分别构建了 4 个真核表达载体, pcDNA3.1(-)-HSP70WT (HSP70 野生型), pcDNA3.1(-)-HSP70ΔNLS (核定位信号缺失突变体 ), pEGFP-N1-HSP70WT, pEGFP-N1- HSP70ΔNLS. 向传代培养的 C2C12肌源细胞培养液中加入终浓度为 1.0 mmol/L 的 H2O2 模拟体外氧化应激 . 甲苯胺蓝染色细胞核仁发现,正常细胞仅有一个位于中央的、浓染致密的核仁颗粒 . 过氧化氢处理后 3 h ,可见明显的核仁分离 . 热休克反应处理的细胞及转 pcDNA3.1( - )-HSP70WT 细胞则能明显抑制氧化应激所致的核仁分离 . 荧光蛋白示踪及核仁蛋白质免疫印迹分析显示, H2O2处理后 1 h , HSP70WT 由正常时的细胞浆定位转为细胞核及核仁定位,而 HSP70ΔNLS 在 H2O2处理后仍定位于细胞浆,同时丧失了抑制核仁分离的作用 . 上述结果提示,野生型 HSP70 能显著抑制氧化应激所致细胞核仁分离,核定位信号通过介导 HSP70 向细胞核及核仁移位而决定 HSP70 对核仁损伤的保护作用 .

关 键 词:热休克蛋白 70,核定位信号,氧化应激,核仁,核仁分离

Roles of Nuclear Localization Signal (NLS) in Inhibitory Effect of HSP70 on Nucleolar Segregation Induced by Oxidative Stress
WANG Kang-Kai,E Shun-Mei,JIANG Lei,ZHANG Hua-Li,LIU Ke,ZHANG Ling-Li and XIAO Xian-Zhong. Roles of Nuclear Localization Signal (NLS) in Inhibitory Effect of HSP70 on Nucleolar Segregation Induced by Oxidative Stress[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2005, 32(5): 456-462
Authors:WANG Kang-Kai  E Shun-Mei  JIANG Lei  ZHANG Hua-Li  LIU Ke  ZHANG Ling-Li  XIAO Xian-Zhong
Affiliation:Department of Pathophysiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Department of Pathophysiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Department of Pathophysiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Department of Pathophysiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Department of Pathophysiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Department of Pathophysiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Department of Pathophysiology, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China
Abstract:
Keywords:heat shock protein 70 (HSP70)   nuclear localization signal (NLS)   oxidative stress   nucleolus   nucleolar segregation
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