| GST-Ccd1融合蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备 |
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| 作者姓名： | Wu Y Jing XT Ma X Fan WH Fan M |
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| 作者单位： | 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的：利用大肠杆菌DH5α表达GST—Ccd1融合蛋白,并用亲和层析分离纯化,进行动物免疫制备多克隆抗体。方法：利用本室构建好的pGEX-5X-1-Ccd1-N原核表达重组质粒,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达,在大肠杆菌表达系统中获得可溶性表达。经谷胱甘肽Sepharose 4B介质填充的层析柱分离纯化蛋白,制备抗原免疫动物,得到Ccd1的兔源多克隆抗体。结果：ELISA结果显示血清抗体效价可以达到1∶40 000。免疫组化分析表明自制的抗体能特异性与Ccd1蛋白相互作用,可以用于实验分析。结论：制备了效价高特异性良好的抗Ccd1多克隆抗体,经实验验证获得的抗体能够满足针对Ccd1的免疫印迹和免疫组化检测的实验要求,为今后深入研究Ccd1表达的组织分布、细胞内定位及其生物学功能提供了有用的实验工具。
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| 关 键 词： | Ccd1基因 融合表达 多克隆抗体 ELISA 融合蛋白 表达 纯化 多克隆 抗体制备 EXPRESSION FUSION PROTEIN PREPARATION POLYCLONAL ANTIBODY 实验要求 生物学功能 细胞内定位 组织分布 研究 免疫组化检测 免疫印迹 足针 实验验证 高特异性 实验分析 |
| 文章编号： | 1000-6834（2008）01-122-03 |
| 收稿时间： | 2006-09-13 |
| 修稿时间： | 2007-09-07 |
Expression, purification and polyclonal antibody preparation of GST-Ccd1 fusion protein |
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| Wu Y,Jing XT,Ma X,Fan WH,Fan M.Expression, purification and polyclonal antibody preparation of GST-Ccd1 fusion protein[J].Chinese Journal of Applied Physiology,2008,24(1):122-124. |
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| Authors: | Wu Yan Jing Xiao-Tang Ma Xin Fan Wen-Hong Fan Ming |
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| Institution: | Institute of Basic Medical Sciences, Academy of Military Medical Sciences, Beijing 100850, China. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Ccdl gene fusion protein expression polyclonal antibody ELISA |
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