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尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶A_2Ⅱ的表达及其生化特征
作者姓名:刘小龙  朱洪  吴祥甫  周元聪
作者单位:中国科学院上海生物化学研究所!上海200031
基金项目:中国科学院重大项目基金资助!( KY95 1-A1-301-02-02)
摘    要:将尖吻蝮蛇毒酸性磷酯酶 A2 ( A.a APLA2 )基因克隆至温敏表达载体 p BLMVL2 ,在大肠杆菌 RR1中成功诱导表达 .表达产物 A.a APLA2 约占细菌蛋白质总量 2 5 % ,并以包涵体形式存在 .纯化包涵体后 ,将产物变性、复性 ,然后用 FPLC Superose TM1 2纯化 ,产物经过 SDS- PAGE检测只有单一条带 .对纯化后的表达 A.a APLA2 进行了酶活性、抑制血小板聚集活性和溶血活性的测定 .结果显示 ,A.a APLA2 的酶活性处于变性后复性江浙蝮蛇酸性磷脂酶 A2 和碱性磷脂酶A2 的酶活性之间 ,没有抑制血小板聚集活性 ,只有微弱溶血活性 .最后对 PLA2 的结构与这些活性的关系进行了讨论

关 键 词:尖吻蝮蛇酸性磷脂酶A_2Ⅱ  表达  活性测定  结构  功能  
收稿时间:2000-02-20
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