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4个品系小鼠胚胎干细胞系的建立
引用本文:蒋永华,孙筱放,郑育红,张文红,银益飞,廖宝平. 4个品系小鼠胚胎干细胞系的建立[J]. 细胞生物学杂志, 2007, 29(4): 585-589
作者姓名:蒋永华  孙筱放  郑育红  张文红  银益飞  廖宝平
作者单位:广州医学院第三附属医院 广州市生殖与遗传重点实验室,广州医学院第三附属医院,广州市生殖与遗传重点实验室,广州医学院第三附属医院,广州市生殖与遗传重点实验室,广州医学院第三附属医院,广州市生殖与遗传重点实验室,广州医学院第三附属医院,广州市生殖与遗传重点实验室,广州医学院第三附属医院,广州市生殖与遗传重点实验室,广州510150,广州510150,广州510150,广州510150,广州510150,广州510150
基金项目:广东省科技厅重大攻关课题;广州市科技局科技攻关计划重大项目
摘    要:探索高效的不同品系的小鼠胚胎干细胞的建系方法。B6D2F1(C57BL/6×DBA/2)、129/SV×DBA/2、C57BL/6、BALB/C等4个不同品系小鼠,孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotrophin,PMSG) 人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)促排,3.5天交配后(days post coitus,dpc)冲洗子宫取囊胚,或者2.5dpc冲洗输卵管,卵裂球体外培养获取囊胚。囊胚种植到小鼠成纤维细胞饲养层上干细胞培养液培养,4~5天内细胞团扩增后玻璃毛细管挑出,种植到新的饲养层上过夜再行胰蛋白酶消化,3~4天传代一次。对所建立的小鼠ES细胞系进行形态学、染色体核型、AKP染色、体内外分化能力,干细胞分子标记物荧光免疫染色等鉴定。获得10株小鼠胚胎干细胞,具有典型的胚胎干细胞生长特性,符合ES细胞的鉴定标准。结果表明成功的建立了来自B6D2F1(C57BL/6×DBA/2)、129/SV×DBA/2、C57BL/6、BALB/C等4个不同品系小鼠的10株ES细胞系。内细胞团挑出过夜增殖后消化的培养方法可能有助于提高ES细胞的建系率。

关 键 词:小鼠品系  胚胎干细胞系  内细胞团  体外培养
修稿时间:2006-11-22

Isolation and Cultivation of Embryonic Stem Cell Lines Derived from Pre-implantation Mouse Embryos of Four Different Strains
Yong-Hua Jiang,Xiao-Fang Sun,Yu-Hong Zheng,Wen-Hong Zhang,Yi-Fei Yin,Bao-Ping Liao. Isolation and Cultivation of Embryonic Stem Cell Lines Derived from Pre-implantation Mouse Embryos of Four Different Strains[J]. Chinese Journal of Cell Biology, 2007, 29(4): 585-589
Authors:Yong-Hua Jiang  Xiao-Fang Sun  Yu-Hong Zheng  Wen-Hong Zhang  Yi-Fei Yin  Bao-Ping Liao
Abstract:
Keywords:mouse stains  embryonic stem cell line  inner cell mass  in vitro culture
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