人尿激酶原cDNA序列缺失突变体的构建及表达 |
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引用本文: | 韩素文,俞炜源,程度胜,胡宝成.人尿激酶原cDNA序列缺失突变体的构建及表达[J].生物工程学报,1997,13(2):127-131. |
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作者姓名: | 韩素文 俞炜源 程度胜 胡宝成 |
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作者单位: | 军事医学科学院生物工程研究所 北京 100071 |
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基金项目: | 军队“八五”医药卫生科研基金 |
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摘 要: | 采用PCR重叠延伸法和基因重组技术构建了人尿激酶原cDNA序列中缺失150~156位氮基酸的突变体,以COS-7细胞中获得暂时性表达以及在CHO细胞中稳定高效表达,其表达水平为450~500IU/106cell/24h,表达产物经SDS-PAGE电转溶实验和westemblot分析证明,细胞分泌的Pro-UK突变体与天然Pro-UK以及完整全长DNA序列表达Pro-UK的分子量相同,为54kDa.绝大多数为单链,比完整cDNA序列表达产物的单链比例明显增高,与纤维蛋白的亲和性有所提高。
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关 键 词: | 人尿激酶原.突变体,构建,表达 |
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