抑制消减杂交结合cDNA微阵列技术鉴定人肾癌组织高表达基因谱 |
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引用本文: | 艾军魁,张志文,辛殿祺,朱宏建,严泉剑,辛钟成,那彦群,郭应禄.抑制消减杂交结合cDNA微阵列技术鉴定人肾癌组织高表达基因谱[J].中国科学C辑,2003,33(5):436-445. |
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作者姓名: | 艾军魁 张志文 辛殿祺 朱宏建 严泉剑 辛钟成 那彦群 郭应禄 |
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作者单位: | 1. 北京大学泌尿外科研究所,北京大学第一医院泌尿外科,北京,100034 2. 北京大学医学部生理学系,北京,100083 3. 第四军医大学西京医院泌尿外科,西安,710033 |
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基金项目: | 首都医学发展科研基金(批准号:ZD199803),北京大学人类疾病基因中心科研基金 |
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摘 要: | 为克隆肾癌组织高表达基因, 探讨肾癌发生、发展的分子基础, 以人肾癌组织mRNA为试验方, 正常肾组织mRNA为对照构建抑制消减杂交文库. 用文库379个克隆制作基因芯片, 以同位素标记探针对文库进行高通量筛选, 对肾癌组织中表达增高6倍以上的67个克隆进行测序, 结果在GenBank中进行比对分析, 其中4个克隆为新EST片段, 2个为KIAA类基因, 其余克隆为已知基因. 其中已有文献报道的肾癌相关基因, 如VEGF, 波形蛋白, 组织因子等, 大部分为新发现的肾癌相关基因, 包括锌带蛋白、垂体瘤转化基因1等. 3个EST及一些在肾癌组织中高表达的已知基因以Northern杂交、RT-PCR作了验证. 免疫组化与Western blot进一步证实锌带蛋白与垂体瘤转化基因1在肾癌组织中表达显著增强. 这些高表达的基因可能成为肾癌诊断、治疗的潜在靶点, 有助于从基因谱的角度进一步认识肾癌发生、发展的分子机制.
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关 键 词: | 基因芯片 肾癌 基因 差异表达 抑制消减杂交 |
收稿时间: | 2003-03-05 |
修稿时间: | 2003年3月5日 |
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