| 蔗糖异构酶PalI在解脂耶氏酵母中的表面展示 |
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| 引用本文： | 吴琦,黄思敏,郭小宇,李宪臻,刘家豪,陈慧玲,李思彭.蔗糖异构酶PalI在解脂耶氏酵母中的表面展示[J].微生物学通报,2022,49(8):3094-3106. |
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| 作者姓名： | 吴琦 黄思敏 郭小宇 李宪臻 刘家豪 陈慧玲 李思彭 |
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| 作者单位： | 大连工业大学生物工程学院微生物资源与催化实验室, 辽宁 大连 116033 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31771907) |
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| 摘 要： | 【背景】蔗糖异构酶(PalI)生物转化蔗糖是目前生产异麦芽酮糖的主要方法,但在生产过程中存在的蔗糖异构酶转化蔗糖副产物比例较高、游离酶需要分离纯化等问题限制了异麦芽酮糖工业生产的应用。【目的】构建蔗糖异构酶PalI在解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica) Po1g中的表面展示菌株,以降低蔗糖异构酶转化蔗糖的副产物比例及其纯化成本。【方法】为获得具有生产PalI能力的Y.lipolytica Po1g表面展示菌株,通过重叠延伸PCR将克雷伯氏菌(Klebsiella singaporensis)LX3的PalI的编码基因PalI与全基因合成的来自Y.lipolytica细胞壁的锚定蛋白Pir1融合,转入Y.lipolytica Po1g中构建表面展示菌株。利用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)比色定糖法测定表面展示的PalI酶活力并对其酶学性质进行探究,通过高效液相色谱法分析其转化蔗糖的产物。【结果】构建了蔗糖异构酶表面展示菌株Pir1-PalI/Po1g,经DNS法测得展示在Y. lipolytica Po1g表面的Pal...
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| 关 键 词： | 蔗糖异构酶 解脂耶氏酵母 表面展示系统 酵母细胞壁锚定蛋白Pir1 酶学性质 |
| 收稿时间： | 2021/12/7 0:00:00 |
Effective surface display of sucrose isomerase PalI on the cells of Yarrowia lipolytica |
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| WU Qi,HUANG Simin,GUO Xiaoyu,LI Xianzhen,LIU Jiahao,CHEN Huiling,LI Sipeng.Effective surface display of sucrose isomerase PalI on the cells of Yarrowia lipolytica[J].Microbiology,2022,49(8):3094-3106. |
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| Authors: | WU Qi HUANG Simin GUO Xiaoyu LI Xianzhen LIU Jiahao CHEN Huiling LI Sipeng |
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| Institution: | Laboratory of Microbial Resources and Catalysis, School of Biological Engineering, Dalian Polytechnic University, Dalian 116033, Liaoning, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sucrose isomerase Yarrowia lipolytica surface display system yeast cell wall-anchoring protein Pir1 enzymatic properties |
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