| 嗜碱细菌Cellulomonas bogoriensis 69B4T木聚糖酶的表达纯化及性质研究 |
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| 引用本文： | 袁鸣一,董佳莹,陈爱玲,鞠斯成,李凡.嗜碱细菌Cellulomonas bogoriensis 69B4T木聚糖酶的表达纯化及性质研究[J].微生物学报,2021,61(10):3114-3127. |
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| 作者姓名： | 袁鸣一 董佳莹 陈爱玲 鞠斯成 李凡 |
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| 作者单位： | 东北师范大学生命科学学院, 吉林 长春 130024 |
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| 基金项目： | 吉林省自然科学基金（20180101346JC） |
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| 摘 要： | 【目的】对嗜碱细菌Cellulomonas bogoriensis 69B4~T产碱性木聚糖酶进行研究,克隆来源于该菌株的木聚糖酶基因,并对其进行异源表达、纯化及酶学性质的表征,为后续研究碱性木聚糖酶的耐碱机制及应用奠定基础。【方法】采用单因素分析法对菌株产碱性木聚糖酶情况进行研究;通过基因组分析,锚定5个内切木聚糖酶基因,利用同源扩增的方法进行克隆,并在大肠杆菌中重组表达,利用亲和层析对重组酶进行纯化,以木聚糖为底物表征木聚糖酶的酶学性质。【结果】来源于C. bogoriensis 69B4~T的5种木聚糖酶Xyn370、Xyn393、Xyn425、Xyn466和Xyn486均在大肠杆菌内实现了异源表达,并经亲和层析获得纯酶组分,其最适反应温度分别为60、50、40、40、60°C,在50°C范围内保温2h,残余酶活均在90%以上;最适反应p H分别为7.0、8.0、8.0、8.0、9.0,在p H5.0–9.0时具有较好的稳定性;5种重组木聚糖酶对部分金属离子和高浓度盐表现出较好的耐受性,对榉木木聚糖的酶活性最高,均为内切型木聚糖酶。【结论】本研究表达纯化的5种重组木聚糖酶具有耐盐碱的优良特性,且对温度、某些金属离子和化学试剂耐受,为研究木聚糖酶的耐碱机制及工业应用提供了酶源。
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| 关 键 词： | 嗜碱细菌 木聚糖酶 异源表达 酶学性质 |
| 收稿时间： | 2020/12/8 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2021/1/23 0:00:00 |
Expression, purification and characterization of xylanase from alklinphilic bacterium Cellulomonas bogoriensis 69B4T |
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| Mingyi Yuan,Jiaying Dong,Ailing Chen,Sicheng Ju,Fan Li.Expression, purification and characterization of xylanase from alklinphilic bacterium Cellulomonas bogoriensis 69B4T[J].Acta Microbiologica Sinica,2021,61(10):3114-3127. |
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| Authors: | Mingyi Yuan Jiaying Dong Ailing Chen Sicheng Ju Fan Li |
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| Institution: | School of Life Sciences, Northeast Normal University, Changchun 130024, Jilin Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | alkaliphilic bacterium xylanase heterologous expression characterization |
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