| 一种快速筛选有效RNAi片段的方法 |
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| 引用本文： | 邢雪琨,徐存拴,张富春,马纪. 一种快速筛选有效RNAi片段的方法[J]. 生物技术, 2010, 20(6). DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2010.06.192 |
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| 作者姓名： | 邢雪琨 徐存拴 张富春 马纪 |
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| 基金项目： | 国家"973"项目前期研究专项 |
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| 摘 要： | 目的:介绍一种快速筛选有效RNAi片段的方法.方法:构建CC趋化因子配体2(chemokine(C-C motif)ligand 2,CCL2)的表达载体、干涉载体和检验载体;计算检验载体的绿色荧光蛋白(GFP)阳性细胞率;Real-time PCR检测干涉载体的干涉效果;计算PH 72h和168h转基因大鼠的肝再生率.结果:检验载体及其对照在24h表达GFP的细胞数最多,其中检验载体CCL2-CCL2(255)在各时间点的表达量均最低;Real-time PCR结果显示干涉载体CCL2(255)干涉效果较好;表达载体CCL2-N1能提高转基因大鼠PH 168h的肝再生率,达105%,而干涉载体CCL2(255)仅78%,与对照均有显著差异.结论:将靶基因和干涉片段构建到同一个载体上,通过观察、计算GFP的表达量可快速筛选有效RNAi片段,此法高效经济、省时省力.
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| 关 键 词： | CC趋化因子配体2 干涉载体 检验载体 肝再生率 |
A Method for Rapidly Seeking Out Effective RNAi Fragment |
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| XING Xue-kun,XV Cun-shuan,ZHANG Fu-chun,MA Ji. A Method for Rapidly Seeking Out Effective RNAi Fragment[J]. Biotechnology, 2010, 20(6). DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2010.06.192 |
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| Authors: | XING Xue-kun XV Cun-shuan ZHANG Fu-chun MA Ji |
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