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基于葡萄糖脉冲的同位素稀释质谱检测法标品制备
引用本文:舒威,李超,刘晓云,夏建业,庄英萍. 基于葡萄糖脉冲的同位素稀释质谱检测法标品制备[J]. 生物工程学报, 2017, 33(11): 1869-1876
作者姓名:舒威  李超  刘晓云  夏建业  庄英萍
作者单位:华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237,华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237,华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237,华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237,华东理工大学 生物反应器工程国家重点实验室,上海 200237
基金项目:国家自然科学基金青年基金 (No. 21506052),中央高校基本科研业务费专项基金 (No. 222201414037) 资助。
摘    要:同位素稀释质谱检测法(IDMS)是目前进行胞内代谢物浓度高通量检测精度最高的一种方法,这个方法的关键就是制备待检测代谢物对应的~(13)C全标记的标品。传统制备~(13)C全标记标品的方法是采用批培养的模式获取,但该方法所制备的胞内代谢物浓度通常较低。通过以~(13)C全位标记葡萄糖作为唯一碳源培养毕赤酵母G/DSEL菌种,采用~(13)C全位标记葡萄糖脉冲刺激法,结合快速取样淬灭方法的新方法,成功制备了带~(13)C标记标品并提高了其浓度。经液质联用(LC-MS)与气质联用(GC-MS)结果分析,与传统制备方法相比,胞内大部分有机酸、磷酸糖、氨基酸和核苷酸类物质的浓度实现了约2–10倍的提高。因此底物脉冲法可以有效提高~(13)C全标葡萄糖的单位利用率,并能实现对胞内部分含量低于仪器检测限的代谢物的检测。

关 键 词:毕赤酵母G/DSEL,IDMS标品,底物脉冲,快速取样,液质联用,气质联用
收稿时间:2017-02-16

Preparation of Isotope Dilution Mass Spectrometry standards based on glucose pulse
Wei Shu,Chao Li,Xiaoyun Liu,Jianye Xia and Yingping Zhuang. Preparation of Isotope Dilution Mass Spectrometry standards based on glucose pulse[J]. Chinese journal of biotechnology, 2017, 33(11): 1869-1876
Authors:Wei Shu  Chao Li  Xiaoyun Liu  Jianye Xia  Yingping Zhuang
Affiliation:State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China,State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China,State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China,State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China and State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China
Abstract:
Keywords:Pichia pastoris G/DSEL   IDMS standard   substrates pulse   fast sampling   LC-MS   GC-MS
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