| 制备禽致病性大肠杆菌菌蜕的三种方法比较 |
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| 引用本文： | 胡剑刚,董洪亮,付立霞,左佳坤,吴小卡,米荣升,黄燕,陆珂,陈兆国,韩先干,胡世君.制备禽致病性大肠杆菌菌蜕的三种方法比较[J].生物工程学报,2017,33(12):2009-2016. |
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| 作者姓名： | 胡剑刚 董洪亮 付立霞 左佳坤 吴小卡 米荣升 黄燕 陆珂 陈兆国 韩先干 胡世君 |
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| 作者单位： | 1 西南大学动物科学学院，重庆 402460；2 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241,3 扬州大学 动物科学与技术学院 江苏省人畜共患病学重点实验室，江苏 扬州 225009,2 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241,2 中国农业科学院上海兽医研究所，上海 200241,1 西南大学动物科学学院，重庆 402460 |
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| 基金项目： | 上海市科技兴农重点攻关项目 (No. 2015HNG1-9)，国家自然科学基金 (No. 31370045)，江苏省人兽共患病学重点实验室项目 (No. R1510) 资助。 |
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| 摘 要： | 菌蜕(Bacterial ghosts)是一种只含有细菌内、外膜结构的细菌空壳,可作为新型疫苗和传递载体。本研究通过3种方式制备禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenicity Escherichia coli,APEC)分离株DE17的菌蜕,评价不同的菌蜕制备方法。结果表明,利用噬菌体Phi X174的裂解基因E构建的溶菌质粒pBV220-E制备DE17菌蜕,对DE17菌株裂解率可达99.9%,扫描电镜观测结果表明,在DE17两端或中部形成可见的跨膜孔道,呈现典型的菌蜕结构。利用合成的细胞穿透肽MAP(KLALKLALKALKAALKLA)作用于DE17制备菌蜕,结果表明,10μmol/L的MAP可实现对OD_(600)=0.1的DE17完全灭活,扫描电镜虽未看到明显的跨膜孔道,但细菌的膜结构呈现沟壑状,而构建的可表达MAP的溶菌质粒pBV220-MAP并不能实现对DE17的裂解作用。本研究通过比较分析不同APEC菌蜕的制备方式,为进一步研究菌蜕疫苗和提高菌蜕疫苗的生物安全性提供参考。
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| 关 键 词： | 裂解基因E，菌蜕，细胞穿透肽，禽致病性大肠杆菌 |
| 收稿时间： | 2017/3/7 0:00:00 |
Comparison of three methods for preparation of bacterial ghosts from avian pathogenic Escherichia coli |
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| Institution: | 1 College of Animal Science, Southwest University, Chongqing 402460, China; 2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,3 Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis, College of Animal Science and Technology, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China,2 Shanghai Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Shanghai 200241, China and 1 College of Animal Science, Southwest University, Chongqing 402460, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | lysis gene E bacterial ghost cell-penetrating peptide avian pathogenic Escherichia coli |
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