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甲基化受体蛋白MCP2923在睾丸酮丛毛单胞菌CNB-1趋化过程中的作用
引用本文:何蕴喆,黄舟,姜成英,刘双江.甲基化受体蛋白MCP2923在睾丸酮丛毛单胞菌CNB-1趋化过程中的作用[J].微生物学报,2017,57(11):1676-1687.
作者姓名:何蕴喆  黄舟  姜成英  刘双江
作者单位:中国科学院微生物研究所, 北京 100101;中国科学院大学, 北京 100049,中国科学院微生物研究所, 北京 100101;中国科学院大学, 北京 100049,中国科学院微生物研究所, 北京 100101;中国科学院大学, 北京 100049;IMCAS-RCEECAS 环境微生物技术联合实验室, 北京 100101,中国科学院微生物研究所, 北京 100101;中国科学院大学, 北京 100049;IMCAS-RCEECAS 环境微生物技术联合实验室, 北京 100101
基金项目:国家自然科学基金(31230003)
摘    要:【目的】MCP2923是睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)CNB-1的一种甲基化趋化受体蛋白,本研究旨在阐明其在CNB-1菌株趋化过程中的作用。【方法】利用游动平板法(swimming plate)检测了CNB-1及其MCP突变菌株CNB-1?20、CNB-1?MCP2923、CNB-1?20/p DSK519-MCP2923、CNB-1?20/p BBR1MCS-2-MCP2923和CNB-1?20/p BBR1MCS-2-MCP2923?LBD对35种芳香族化合物以及9种小分子有机酸的趋化性;进一步利用Agarose-in-plug法表征了MCP2923介导的对芳香族化合物的趋化表型;结合生物信息学分析,对MCP2923配体结合结构域(MCP2923LBD)进行了克隆、表达和纯化,利用等温滴定量热法(ITC)检测了MCP2923LBD与原儿茶酸等11种化合物的相互作用。【结果】CNB-1对原儿茶酸、4-羟基苯甲酸等12种芳香族化合物以及顺乌头酸等9种TCA循环中间代谢产物具有强、中强和弱3个层次的趋化表型;敲除MCP2923基因减弱了菌株对上述趋化诱导物的表型;将MCP2923基因回补到CNB-1?20菌株中可回补菌株对15种趋化效应物的表型,敲除MCP2923基因的配体结合区丧失了对15种趋化物的表型回补能力。虽然Agarose-in-plug法检测到了菌株对原儿茶酸和4-羟基苯甲酸的趋化表型,但ITC未能检测到原儿茶酸和4-羟基苯甲酸等11种化合物与MCP2923LBD直接的相互作用。【结论】MCP2923可引发CNB-1菌株对多种芳香族化合物以及小分子有机酸的趋化表型,且MCP2923LBD在这个过程中起关键作用;由于ITC的结果不能证明MCP2923LBD与芳香化合物和小分子有机酸等效应物的直接结合,推测MCP2923引发CNB-1趋化作用的机制不同于已报道的MCP2201和MCP2901的作用方式,其确切机制还有待于进一步深入研究。

关 键 词:睾丸酮丛毛单胞菌CNB-1  甲基化受体蛋白(MCP)  细菌趋化性  芳香化合物  三羧酸循环(TCA)
收稿时间:2017/2/7 0:00:00
修稿时间:2017/4/4 0:00:00

Chemotactic responses towards various organic compounds mediated by MCP2923 in Comamonas testosteroni CNB-1
Yunzhe He,Zhou Huang,Chengying Jiang and Shuangjiang Liu.Chemotactic responses towards various organic compounds mediated by MCP2923 in Comamonas testosteroni CNB-1[J].Acta Microbiologica Sinica,2017,57(11):1676-1687.
Authors:Yunzhe He  Zhou Huang  Chengying Jiang and Shuangjiang Liu
Institution:Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China,Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China,Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China;IMCAS-RCEECAS Joint Laboratory for Environmental Microbial Technology, Beijing 100101, China and Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China;IMCAS-RCEECAS Joint Laboratory for Environmental Microbial Technology, Beijing 100101, China
Abstract:
Keywords:Comamonas testosteroni CNB-1  methyl-accepting chemotaxic protein (MCP)  bacterial chemotaxis  aromatic compounds  tricarboxylic acid cycle
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