| miRNA-1和miRNA-133过表达对L6细胞增殖与分化的影响 |
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| 引用本文： | 弓贺炜,;李波,;李文斌,;李刚,;梁炳生. miRNA-1和miRNA-133过表达对L6细胞增殖与分化的影响[J]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2014, 0(2): 11-16 |
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| 作者姓名： | 弓贺炜, 李波, 李文斌, 李刚, 梁炳生 |
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| 作者单位： | [1]山西医科大学第二临床医学院,太原030001; [2]山西医科大学第二医院,太原030001; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目（81171722）;国家自然科学基金青年科学基金项目（81101365） |
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| 摘 要： | 目的观察大鼠微小RNA-1（miR-1）、微小RNA-133（miR-133）过表达对L6成肌细胞增殖分化的影响。方法分别构建miR-1、miR-133的重组慢病毒载体,并进行测序鉴定,稳定转染L6细胞后,用RT-PCR Taqman探针的方法检测miR-1、miR-133的表达水平;细胞计数实验（CCK-8试剂盒）评价miR-1、miR-133过表达后对L6细胞增殖的影响。诱导稳定转染后L6成肌细胞进行分化,观察miR-1、miR-133过表达后对L6细胞分化的影响。以Western blot法检测miR-1、miR-133过表达后,α肌动蛋白（skeletalα-actin）表达水平的变化。采用Kruskal-Wallis H检验、重复测量和单因素方差分析进行比较。结果miR-1慢病毒载体经酶切和测序鉴定序列准确,转染48 h后L6细胞miR-1组（4.292±0.50）比control组（0.231±0.86）、miR-133组（0.205±0.48）比control组（3.564±0.45）表达均显著上调（P〈0.001）;细胞计数和细胞分化实验显示,培养120 h后,过表达miR-1的L6细胞α肌动蛋白（skeletalα-actin）比对照组（0.415±0.02）表达显著升（0.676±0.02,F=222.144,P〈0.001）,分化明显加快,但增殖无明显变化;而过表达miR-133的L6细胞增殖明显加快,α肌动蛋白表达呈下降趋势（0.363±0.02,F=2385.643,P〈0.001）,分化受到抑制。结论 miR-1、miR-133慢病毒表达载体稳定转染L6成肌细胞后高效表达miR-1和miR-133,miR-1可促进L6细胞分化,miR-133能促进L6细胞增殖但抑制其分化。
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| 关 键 词： | 慢病毒载体 微RNAs 细胞分化 细胞增殖 肌动蛋白类 |
Effect of overexpression of miRNA-1 and miRNA-133 on proliferation and differentiation of L6 cells |
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| Affiliation: | Gong Hewei,Li Bo,Li Wenbin,Li Gang,Liang Bingsheng(2nd Clinical Medical College of Shanxi Medical University, Taiyuan 030001, China.) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lentiviral vector microRNAs Cell differentiation Cell proliferation Actinin |
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