人腺苷酸环化酶激活多肽cDNA克隆和序列分析 |
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作者姓名: | 余焱林 刘飞鹏 |
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作者单位: | 第一军医大学细胞生物学与医学遗传学教研室 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,广东省科学基金 |
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摘 要: | 以人睾丸组织总RNA为材料,用RT-PCR方法合成了人腺苷酸环化酶激活多肽(ACAP)编码区(530bp)和全长cDNA(1930bp)片段.并分别将这些cDNA片段克隆入pUC18载体的SmaⅠ限制性内切酶位点.对重组质粒分别采用直接DNA双链末端终止法和在核酸外切酶Ⅲ和核酸酶S1作用下连续缺失DNA后,相继克隆,构成一系列连续缺失的缺失体的方法,测定了全部核苷酸顺序.结果表明:ACAP编码区的cDNA顺序与已报道的有12处碱基的改变,其中11处碱基顺序的改变不引起编码的氨基酸变化,只有第385位的T→A后,才引起其编码的氨基酸由Ser→Thr,但由于Ser和Thr的理化性质极其相似,这一变化可能并不导致蛋白质的生物活性的变化.这些改变可能是由于种族、群体或个体的差异.
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关 键 词: | 腺苷酸环化酶激活多肽 睾丸 RT-PCR DNA重组 核苷酸顺序 |
收稿时间: | 1998-06-20 |
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