反向斑点杂交检测泰泽病原体 |
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引用本文: | 赵婷婷,严磊,魏立雯,韦莉,王会娟,赖国旗,谭毅.反向斑点杂交检测泰泽病原体[J].中国实验动物学报,2014(3). |
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作者姓名: | 赵婷婷 严磊 魏立雯 韦莉 王会娟 赖国旗 谭毅 |
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作者单位: | 重庆医科大学实验动物中心;泸州医学院科技处实验动物中心;重庆市中药研究院; |
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基金项目: | 重庆市科委科技创新能力建设项目《重庆市啮齿类实验动物工程技术研究中心》CSTC,2010CB5013 |
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摘 要: | 目的建立一种简洁稳定、特异灵敏的检测泰泽病原体(Tyzzer’s organism)的反向斑点杂交方法(reverse dot blot,RDB)。方法根据泰泽病原体16S rDNA保守基因组序列设计引物和特异性探针,上游引物用生物素标记,进行PCR扩增,建立反向斑点杂交方法,用此法进行了特异性和灵敏度实验,同时,用RDB、ELISA和IFA对41只小鼠、38只大鼠进行了检测。结果 RDB特异性强,最低检测限为4.5 ng/μL。对79例实验动物的检测中,与ELISA检测结果一致性为100%,阳性率是7.59%(6/79);与IFA一致性为92.4%(73/79),IFA阳性率是0%。结论建立了PCR扩增与分子杂交相结合的准确、灵敏、特异的泰泽病原体反向斑点杂交检测方法。
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关 键 词: | 泰泽病原体 反向斑点杂交 实验动物 |
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