α-乙酰乳酸脱羧酶基因在枯草芽孢杆菌中的整合型表达 |
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作者姓名: | 廖东庆 陈发忠 岳田芳 张云光 黄日波 李晓明 |
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作者单位: | 1. 广西南宁邦尔克生物技术有限责任公司,南宁,530003;广西大学生命科学与技术学院,南宁,530005 2. 广西南宁邦尔克生物技术有限责任公司,南宁,530003 3. 广西大学生命科学与技术学院,南宁,530005;广西科学院,南宁,530003 |
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基金项目: | 广西科学研究与技术开发计划项目 |
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摘 要: | α-乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中能加快啤酒成熟,有重要的应用价值。本研究将枯草芽孢杆菌启动子P43克隆到质粒pUC19-ALDC中的α-乙酰乳酸脱羧酶基因之前,得到重组质粒pUC19-P43-ALDC。重组质粒pUC19-P43-ALDC与质粒pMLK83-BN同源重组,筛选得到枯草芽孢杆菌整合质粒pMLK83-ALDC。用此整合质粒转化枯草芽孢杆菌1A751,挑选出新霉素抗性且无淀粉酶活性的重组菌株。此菌株用LB培养基在37℃、220r/min摇瓶培养过夜,测得α-乙酰乳酸脱羧酶活力为15.6U/mL,说明整合的α-乙酰乳酸脱羧酶基因能够在重组菌株中稳定传代和表达。本研究首次在枯草芽孢杆菌中用整合型的方式重组表达了α-乙酰乳酸脱羧酶,提出了一种有潜力的生产α-乙酰乳酸脱羧酶的新方法。
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关 键 词: | α-乙酰乳酸脱羧酶 枯草芽孢杆菌 整合表达 同源重组 |
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