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α-乙酰乳酸脱羧酶基因在枯草芽孢杆菌中的整合型表达
作者姓名:廖东庆  陈发忠  岳田芳  张云光  黄日波  李晓明
作者单位:1. 广西南宁邦尔克生物技术有限责任公司,南宁,530003;广西大学生命科学与技术学院,南宁,530005
2. 广西南宁邦尔克生物技术有限责任公司,南宁,530003
3. 广西大学生命科学与技术学院,南宁,530005;广西科学院,南宁,530003
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目 
摘    要:α-乙酰乳酸脱羧酶在啤酒生产中能加快啤酒成熟,有重要的应用价值。本研究将枯草芽孢杆菌启动子P43克隆到质粒pUC19-ALDC中的α-乙酰乳酸脱羧酶基因之前,得到重组质粒pUC19-P43-ALDC。重组质粒pUC19-P43-ALDC与质粒pMLK83-BN同源重组,筛选得到枯草芽孢杆菌整合质粒pMLK83-ALDC。用此整合质粒转化枯草芽孢杆菌1A751,挑选出新霉素抗性且无淀粉酶活性的重组菌株。此菌株用LB培养基在37℃、220r/min摇瓶培养过夜,测得α-乙酰乳酸脱羧酶活力为15.6U/mL,说明整合的α-乙酰乳酸脱羧酶基因能够在重组菌株中稳定传代和表达。本研究首次在枯草芽孢杆菌中用整合型的方式重组表达了α-乙酰乳酸脱羧酶,提出了一种有潜力的生产α-乙酰乳酸脱羧酶的新方法。

关 键 词:α-乙酰乳酸脱羧酶  枯草芽孢杆菌  整合表达  同源重组
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