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海藻酸微囊替代DMSO和FBS的STO细胞冷冻保存研究
引用本文:刘代艳,于泊洋,孔群芳,包佳婧,刘林洪,萨初拉,吴应积. 海藻酸微囊替代DMSO和FBS的STO细胞冷冻保存研究[J]. 现代生物医学进展, 2012, 12(33): 6413-6418
作者姓名:刘代艳  于泊洋  孔群芳  包佳婧  刘林洪  萨初拉  吴应积
作者单位:内蒙古大学哺乳动物生殖生物学与生物技术教育部重点实验室 内蒙古呼和浩特010021
基金项目:内蒙古自治区自然科学基金项目(2009ZD05);教育部创新团队项目(IRT0833)
摘    要:目的:改进现有的细胞冷冻保存方法,建立一个不含二甲基亚砜(DMSO)和血清(FBS)的高效冷冻保存方法,为细胞治疗等临床实践提供优质细胞.方法:海藻酸微囊包埋鼠胚成纤维细胞(STO细胞)后用不含DMSO和FBS的冷冻保存液进行冷冻保存.设四个对照组:添加10%DMSO和20%FBS的组、仅添加10%DMSO的组、仅添加20%FBS、DMSO和FBS均不添加组.在冷冻前后对各实验组细胞用台盼兰染色,进行细胞计数,计算细胞存活率,同时利用溴乙锭的二聚物(EthD)、钙黄绿素-AM(Calcein-AM)进行染色观察细胞的形态,且进一步验证细胞存活率;解冻复苏后用MTT法评估细胞的增殖速度和生长活力.结果:冷冻保存30天后对各组的细胞数量、细胞存活率、细胞形态和解冻复苏后细胞的生长活力进行比较发现,海藻酸微囊包埋冷冻组的细胞数、细胞存活率、细胞形态和生长活力均与添加DMSO和FBS的组之间无显著性差异,而与其它三个对照组呈显著性差异.结论:使用海藻酸微囊替代DMSO和FBS保存STO细胞,能有效的维持细胞形态、数量、存活率,同时不影响细胞的生长活力,从而建立了一个不含DMSO和FBS的高效冷冻保存方法.

关 键 词:海藻酸微囊  二甲基亚砜  胎牛血清  冷冻保存

Research on Alginate Microcapsules Replacing DMSO and FBS on the Cryopreservation of STO Cells
LIU Dai-yan,YU Bo-yang,KONG Qun-fang,BAO Jia-jing,LIU Lin-hong,SA Chu-la,WU Ying-ji. Research on Alginate Microcapsules Replacing DMSO and FBS on the Cryopreservation of STO Cells[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2012, 12(33): 6413-6418
Authors:LIU Dai-yan  YU Bo-yang  KONG Qun-fang  BAO Jia-jing  LIU Lin-hong  SA Chu-la  WU Ying-ji
Affiliation:△(Key Laboratory of Education Ministry of China for Mammalian Reproductive Biology and Biotechnology,University of Inner Mongolia,Inner Mongolia Hohhot,010021,China)
Abstract:
Keywords:
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