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重组hS100A6蛋白的原核表达及其对人骨肉瘤细胞系143B的生物学作用
引用本文:邹正渝,王海燕,黎玉叶,孙双双,叶立伟,武睿,段亮,陈娴,罗进勇,周兰. 重组hS100A6蛋白的原核表达及其对人骨肉瘤细胞系143B的生物学作用[J]. 中国生物工程杂志, 2012, 32(12): 1-7
作者姓名:邹正渝  王海燕  黎玉叶  孙双双  叶立伟  武睿  段亮  陈娴  罗进勇  周兰
作者单位:重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室 重庆 400016
基金项目:国家自然科学基金面上项目(30772548)资助项目
摘    要:目的:制备重组hS100A6蛋白,并研究其对人骨肉瘤细胞系143B的生物学作用。方法:构建pGST-HRV3C-hS100A6质粒,经转化至E.coli BL21,IPTG诱导表达融合蛋白GST-HRV3C-hS100A6,经超声破菌,谷胱甘肽-琼脂糖4B球珠纯化,GST-HRV3C酶切,再纯化,Western blot鉴定,分光光度法蛋白定量。以人骨肉瘤细胞系143B为研究对象,MTT检测细胞增殖,Hoechst检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,Western blot检测hS100A6对β-catenin表达的影响。结果:成功制备重组hS100A6蛋白,测得该蛋白产量约为4mg/L菌液。30μg/ml重组hS100A6促进143B细胞的增殖、迁移、侵袭以及β-catenin的表达(P0.05),对143B细胞的凋亡无明显影响(P0.05)。结论:成功制备重组hS100A6蛋白,30μg/ml重组hS100A6蛋白对143B细胞有一定的促进作用。

关 键 词:hS100A6蛋白  制备  骨肉瘤  
收稿时间:2012-06-28

Prokaryotic Expression of Recombinant Protein HS100A6 and Its Biological Effects on Human Osteosarcoma Cell Line 143B
ZOU Zheng-yu,WANG Hai-yan,LI Yu-ye,SUN Shuang-shuang,YE Li-wei,WU Rui,DUAN Liang,CHEN Xian,LUO Jin-yong,ZHOU Lan. Prokaryotic Expression of Recombinant Protein HS100A6 and Its Biological Effects on Human Osteosarcoma Cell Line 143B[J]. China Biotechnology, 2012, 32(12): 1-7
Authors:ZOU Zheng-yu  WANG Hai-yan  LI Yu-ye  SUN Shuang-shuang  YE Li-wei  WU Rui  DUAN Liang  CHEN Xian  LUO Jin-yong  ZHOU Lan
Affiliation:(Key Laboratory of Laboratory Medical Diagnostics,Ministry of Education,Chongqing Medical University, Chongqing 400016,China)
Abstract:
Keywords:Recombinant hS100A6 protein  Preparation  Osteosarcoma  
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