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大麦黄矮病毒GAV株系ORF4基因在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达及亚细胞定位
引用本文:夏宗良,王美平,刘全军,王道文.大麦黄矮病毒GAV株系ORF4基因在杆状病毒-昆虫细胞系统中的表达及亚细胞定位[J].微生物学报,2007,23(6).
作者姓名:夏宗良  王美平  刘全军  王道文
作者单位:河南农业大学生命科学学院,郑州 450002;河南农业大学图书馆,郑州 450002;河南农业大学生命科学学院,郑州 450002;中国科学院遗传与发育生物学研究所植物细胞与染色体工程国家重点实验室,北京 100101
基金项目:国家自然科学基金项目(No.30521001)资助。
摘    要:根据已报道的大麦黄矮病毒GAV株系(BYDV-GAV)相关基因序列,利用RT-PCR方法获得ORF4基因。在杆状病毒-昆虫细胞系统中,成功表达了ORF4和GFP(绿色荧光蛋白)的融合蛋白(GFP: ORF4),Western blot检测到目的蛋白的表达。利用激光共聚焦显微镜观察其在细胞中的积累和亚细胞分布,发现ORF4基因编码的17 kD蛋白(P4)能进入细胞核,并在细胞核膜上聚集。通过对ORF4基因编码的P4蛋白的N端和C端缺失突变结合蛋白质的结构预测分析,鉴定出N端α螺旋结构对于P4蛋白的核膜定位是必需的。这些结果为进一步研究ORF4基因在黄矮病毒GAV系统侵染中的生物学功能奠定了基础。

关 键 词:大麦黄矮病毒,  杆状病毒-昆虫细胞系统,  亚细胞定位

Expression and Subcellular Localization of the ORF4 gene of Barley Yellow Dwarf Virus GAV Strain in Baculovirus-insect Cell Expression System
XIA Zong-Liang,WANG Mei-Ping,LIU Quan-Jun and WANG Dao-Wen.Expression and Subcellular Localization of the ORF4 gene of Barley Yellow Dwarf Virus GAV Strain in Baculovirus-insect Cell Expression System[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,23(6).
Authors:XIA Zong-Liang  WANG Mei-Ping  LIU Quan-Jun and WANG Dao-Wen
Institution:College of Life Sciences, Hennan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;Library of Hennan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;College of Life Sciences, Hennan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China;The State Key Laboratory of Plant Cell and Chromosome Engineering, Institute of Genetics and Developmental Biology,Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China
Abstract:
Keywords:barley yellow dwarf virus  baculovirus-insect cell system  subcellular localization
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