| 结构域Ⅰ缺失的丙型肝炎病毒5＇NCR调控荧光素酶基因的表达 |
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| 引用本文： | 杨滔,;赵俊琴,;刘水平,;李洪涛,;李建华.结构域Ⅰ缺失的丙型肝炎病毒5＇NCR调控荧光素酶基因的表达[J].生物磁学,2007(5):699-701. |
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| 作者姓名： | 杨滔 ;赵俊琴 ;刘水平 ;李洪涛 ;李建华 |
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| 作者单位： | [1]中南大学湘雅医学院微生物学系,湖南长沙410078 |
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| 基金项目： | 湖南省医药卫生科技项目（B2004-011） |
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| 摘 要： | 目的：分析丙型肝炎病毒（HCV）5＇端非编码区（NCR）的结构域Ⅰ序列在其翻译启动活性中的作用.方法：以质粒pCMVNCRluc为模板,PCR扩增分别得到缺失5＇端20nt和43nt的HCV 5＇NCR片段,并分别替换pCMVNCRluc中的完整HCV 5NCR,构建结构域Ⅰ缺失的HCV 5＇NCR调控萤火虫荧光素酶（luc）基因表达的真核表达质粒（pCNl-d1、pCNl-d2）.以脂质体方法转染人肝癌细胞株HepG2,用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶相对于内参考的海肾荧光素酶表达活性,同时采用RT-PCR方法检测转染后细胞中萤火虫荧光素酶基因的相对表达水平.结果：酶切和测序结果表明,各重组质粒构建成功.各重组质粒转染细胞后luc mRNA的相对表达水平与pCMVNCRluc相比差异无显著性（P＞0.05）;pCNl-d1、pCNl-d2表达的荧光素酶活性与pCMVNCRluc差异无显著性（P＞0.05）.结论：HCV 5NCR的5＇端20nt和43nt序列缺失不影响它的翻译启动活性.
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 荧光素酶 翻译启动活性 |
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