| 大肠杆菌中融合表达人β防御素-3基因的研究 |
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| 引用本文： | 赵亚华,;徐来祥,;张建军,;黄蓬亮,;许少鹏,;宋铭晶.大肠杆菌中融合表达人β防御素-3基因的研究[J].中国实验动物学杂志,2007(11):670-675. |
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| 作者姓名： | 赵亚华 ;徐来祥 ;张建军 ;黄蓬亮 ;许少鹏 ;宋铭晶 |
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| 作者单位： | [1]华南农业大学生命科学学院,广州510640; [2]曲阜师范大学生命科学学院,曲阜273165; [3]中国医学科学院实验动物研究所,北京100021 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（30470247;30770317）;山东省教育厅科技计划项目（重点）（J06104）;济宁市重大科技专项（济科技[2006]011）项目资助. |
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| 摘 要： | 目的 为了在大肠杆菌中融合表达人β防御素-3基因。方法 根据大肠杆菌对精氨酸密码子使用的偏爱性,设计搭桥引物,并通过PCR扩增法合成了人β防御素的全基因序列,克隆进pGEX-4T-2中构建pGEX-4T-2-hBD-3融合表达载体。将表达载体转化E.coli宿主菌DH5α,进行IPTG诱导表达。将菌体反复冻溶使细胞膜穿孔,释放可溶性蛋白。融合蛋白GST-hBD-3经凝血酶切割。结果 研究得到了重组人防御素蛋白,琼脂孔穴扩散抑菌法检测表明,重组人β防御素3对金黄色葡萄球菌有抗菌活性,抑菌效价为0.843 U。结论 人β防御素-3基因在大肠杆菌中得到了融合表达。
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| 关 键 词： | 人β防御素-3 融合表达 反复冻融 金黄色葡萄球菌 抗菌活性 |
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