| 鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达(英) |
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| 引用本文： | 聂新民,张必成,向娟娟,朱诗国,周鸣,董利,余鹰,李小玲,李桂源. 鼻咽癌侯选抑瘤基因BRD7原核表达载体的构建及其表达(英)[J]. 生物化学与生物物理进展, 2002, 29(4): 631-634 |
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| 作者姓名： | 聂新民 张必成 向娟娟 朱诗国 周鸣 董利 余鹰 李小玲 李桂源 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙 410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙 410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙 410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙 410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙 410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙 410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙 410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙 410078;中南大学湘雅医学院肿瘤研究所，长沙 410078 |
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| 基金项目： | 国家高技术“863”计划资助项目(102-10-01-05), 国家重点基础研究发展规划项目(973)(G1998051008）及国家自然科学基金资助项目（39700158, 30000065）. |
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| 摘 要： | BRD7基因是一个鼻咽癌侯选抑瘤基因，为了构建BRD7基因的原核表达载体并使其在大肠杆菌得到表达，设计了带有SalⅠ，NotⅠ酶切位点的引物，以已构建好的质粒pGEM-T Easy/BRD7为模板，用PCR扩增出BRD7基因的完整阅读框架，并用SalⅠ，NotⅠ酶切PCR产物和原核表达载体PGEX-4T-2，然后用T4 DNA连接酶将其连接，得到重组表达质粒PGEX-4T-2/BRD7，经双酶切鉴定和测序验证，表达载体构建正确.重组表达质粒转化感受态大肠杆菌Jm105后用IPTG诱导，成功表达了一分子质量约为90 ku的融合蛋白;37℃诱导4 h后，SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳后，经扫描分析该融合蛋白产量占菌体蛋白总量28.48%, 蛋白质印迹(Western-blot)证实了该融合蛋白的表达获得成功.这为BRD7基因的蛋白纯化及抗体制备，进一步开展其功能研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | 鼻咽肿瘤，基因表达，BRD7基因 |
| 收稿时间： | 2001-11-26 |
| 修稿时间： | 2001-12-30 |
Construction of Prokaryotic Expression Vector of BRD7 and Its Expression in E.coli |
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| NIE Xin-Min,ZHANG Bi-Cheng,XIANG Juan-Juan,ZHU Shi-Guo,ZHOU Ming,DONG Li,YU Ying,LI Xiao-Ling and LI Gui-Yuan. Construction of Prokaryotic Expression Vector of BRD7 and Its Expression in E.coli[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2002, 29(4): 631-634 |
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| Authors: | NIE Xin-Min ZHANG Bi-Cheng XIANG Juan-Juan ZHU Shi-Guo ZHOU Ming DONG Li YU Ying LI Xiao-Ling LI Gui-Yuan |
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| Affiliation: | Cancer Research Institute,Xiang-Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute,Xiang-Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute,Xiang-Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute,Xiang-Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute,Xiang-Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute,Xiang-Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute,Xiang-Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute,Xiang-Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute,Xiang-Ya School of Medicine,Central South University, Changsha 410078, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | nasopharyngeal neoplasms gene expression BRD7 gene |
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