| 木聚糖酶Xyn Ⅱ的D37N突变、表达及酶学性质变化 |
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| 作者姓名： | 周晨妍 李东峰 邬敏辰 王武 |
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| 作者单位： | 1. 江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122
2. 江南大学,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214122;江南大学,医药学院,无锡,214122 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 对来源于宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的木聚糖酶Xyn Ⅱ进行同源建模和序列比较,发现第11族木聚糖酶的催化结构域在β折叠股A3和B3之间存在一个保守的氨基酸位点,该位点与木聚糖酶的pH特性有关,据此设计了Xyn Ⅱ的D37N定点突变.酵母表达的Xyn ⅡD37N 经纯化后与原酶Xyn Ⅱ(同样经毕赤酵母表达后纯化)进行酶学性质比较,结果表明,Xyn ⅡD37N 的最适pH由4.2升高到5.3,pH稳定范围由3.0～7.5缩减为3.0～5.5,但最适温度和热稳定性基本保持不变.结果证实,木聚糖酶Xyn Ⅱ的第37位Asp与最适pH相关,为进一步的结构与功能研究提供了理论基础.
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| 关 键 词： | 宇佐美曲霉 突变 定点 木聚糖酶 木聚糖酶 定点突变 毕赤酵母表达 酶学 性质变化 mutagenesis expression xylanase characterization 理论 结构与功能研究 相关 热稳定性 最适温度 稳定范围 结果 性质比较 原酶 纯化 设计 |
| 文章编号： | 1672-3678(2008)03-0062-06 |
| 修稿时间： | 2007-11-06 |
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